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一、 課題研究的準備工作
2001年9月——2002年1月,我們召開了多次課題組會議,對在高二年級文科班中再深入進行研究性學習的研究實驗工作進行可行性論證,經過論證,我們認為是可行的,其原因有以下幾點:1、高二年級文科班的學生素質較好。近幾年來,我校文科高考成績年年再創新高,在全市多次摘取文科桂冠,使我校文科類學生英才濟濟,匯聚一堂,高二年級文科班的學生素質較好為全校所公認。2、高考改革的趨勢。2000年廣東省高考(3+X+1)文理綜合試題第十九題(上海市中學生開展研究性學習題)是典型的研究性學習的考題;2001年高考上海卷第37題(老山漢墓走出西域美女題)亦屬研究性學習的考題,這兩題的出臺代表了高考改革的方向,它表明研究性學習的考題在高考中開始出現,緊跟高考改革的方向,是高二年級文科班歷史教學的任務。3、高二年級文科班的歷史課是我們課題組成員楊柳、周雪紅老師任教,這對于研究工作的進行較為便利。4、班主任支持。這幾個班的班主任都較為支持,使得研究性學習的研究實驗工作得以順利進行。
二、對學生進行組織動員工作
考慮到高二年級沒有進行研究性學習的課時,我們只能利用歷史課及一些班會課時間進行動員。首先,請教科所蘇敏老師作專題報告(2002年1月),向同學們介紹了國際國內研究性學習的最新動態,以及柳州市幾所中學研究性學習的發展情況,使同學們對研究性學習有了一個初步的了解,其次,請周梅莉老師進行具體的指導,使同學們明確研究性學習不僅是高考改革的方向,而且能夠鍛煉大家的學習、工作能力,是高中階段不可多得的一次鍛煉機會。最后,楊柳、周雪紅老師利用本班歷史課時間向同學們介紹了研究性學習的主要方法及研究程序,布置了研究性學習的具體任務。考慮到高二年級沒有進行研究性學習的課時,這一任務只能利用寒假時間進行,所以,我們把研究性學習的任務以寒假作業(作業全文另存)的方式布置下去,要求學生在放假前將研究性學習的準備工作做好,放假時進行研究,開學后再整理研究成果。
三、組建課題組,制定研究方案
在將寒假作業布置下去后,我們著手進行研究性學習的準備工作——組建課題組,制定研究方案。首先,我們組織學生組成課題組,規定1——5人一組,在自愿的基礎上選舉產生組長,由組長負責小組成員的分工以及與指導老師的聯絡等,并負責將研究課題和本組成員名單交給老師。小組成員共同制定研究課題,在研究過程中,既分工負責,又相互配合,體現全體成員分工與合作的統一。其次,為了把握研究方向,保證進度和質量,我們要求學生制定研究方案,其內容包括課題的名稱,課題研究的主要內容,研究的方法和時間進程,小組成員的分工,預期的研究成果及表現形式等,并規定了研究方案交給老師的時間。最后,進行開題論證工作,研究方案交上來后,我們組織了開題評審會,對每個組的“課題研究方案”進行開題評審(開題評審會記錄另存)。為此,我們制訂了詳細的評分細則,內容有課題組所選(擬)課題的意義、課題組所選(擬)課題的可行性、課題組所選(擬)課題采用的研究方法的恰當程度、課題組對所選(擬)課題的設想的合理程度、課題組成員陳述課題及回答問題的語言組織及表達能力等幾項,依據這一評分細則對學生的課題進行了評分,好的研究方案建議學生保留,不合格的課題要重新準備后再通過開題評審,在此基礎上,開始了研究性學習的實施階段。該文章由diyifanWEN.COM(第一§范┆文網)整理;
四、研究性學習的實施階段
在組建課題組,制定研究方案并通過開題論證之后,我們開始了研究性學習的實施階段。這一階段,由于沒有課時,我們要求學生用寒假時間自主進行研究,我們教師著手進行指導工作。我們指導學生進行資料的收集工作。我們首先指導學生在研究過程中進行分工合作,由小組長負責小組成員的分工,各司其職,各負其責,互相配合進行資料的收集工作。其次,我們給學生講解了進行資料收集工作的方法:1、通過媒體搜集資料。我們指導學生通過媒體搜集資料,如互聯網、圖書館、音像制品、電視、報刊、廣播等媒體,都是較好的搜集資料的媒體。2、實地考察。我們指導學生進行實地考察,由同學們親自到現場勘察,采集相關素材,并提出有條件的同學可以帶照相機、攝像機進行攝影攝像,并將資料輸入計算機。由于沒有課時,只能在假期進行這一工作,所以我們提出必須要在家長陪同下前往并注意安全問題。3、有條件的同學可以到相關部門(如旅游局、旅行社、博物館等單位)搜集相關資料。其實,搜集資料的途徑很多,可謂條條道路通羅馬,除上面的途徑外,還可借助父母的關系,找到調查對象進行座談;借助社會關系,訪問不同層面的調查對象等等。在搜集到相關資料后,一定要注意原始資料(包括文字、圖片、圖像等)的保存,有條件的同學最好將資料輸入計算機保存。
五、研究成果展示
2002年3月,寒假結束了,同學們帶著原始資料回到了校園,我們首先指導他們進行資料的整理工作。同學們搜集到的資料形式多種多樣,不僅有文字資料,還有數據資料、圖片資料、音像資料、軟件資料等。我們組織學生以小組為單位,對搜集到的資料信息進行分類、歸納、整理和提煉,確定總結的內容,選擇最合適、最能反映研究成果的形式,得出研究成果。同學們有的寫出了研究論文,有的寫出了調查報告,有的整理出頗有分量的研究筆記,還有的提交了大量的相片、軟件等,取得成果共記42項(大量成果另存,成果一覽表附后)。我們指導他們在整理資料的基礎上,將所得成果輸入電腦制作成PowerPoint課件, 我們選取了一部分優秀成果,在2002年6月進行了研究成果展示,黃明旻、張超、楊秋慧、胡賓等同學展示了他們制作的課件,對此,我們還進行了現場攝影、攝像(相片、錄像帶另存),這次展示,取得了圓滿成功。
我校歷史組“研究性學習”課題組組建三年了,在我們的共同努力下,研究性學習的研究實驗工作取得了重大進展,通過這一階段的探索和實踐,我們取得了豐碩的成果。當然,我們還有很多工作要做,還需要不斷地探索和鉆研,還希望能夠有更多的機會到兄弟學校學習,不斷補充和完善自己,以提高“研究性學習”的水平。
⒈結題報告的一般格式
研究性學習的結題報告形式多樣,有文獻研究、調查研究和實驗研究等,但基本格式大同小異,一般由標題、摘要、研究背景、正文、參考文獻等部分組成。
⒈⒈標題
標題是課題研究內容的高度概括,在整篇論文中起“畫龍點睛”作用。標題名稱要注意以下幾點:⑴引人注目。題目要新穎,醒目得體,能準確表達研究內容,恰如其分地反映課題研究的廣度和深度。切忌“體會” 、“淺談” 、“管見”之類用語,否則顯得膚淺、俗氣。⑵簡練明了。標題字數要少,直奔主題,使人一目了然。若標題偏長,可增設副標題。⑶便于分類。標題要表明研究的主要變量,能看出研究內容的學科范圍和課題類型。
⒈⒉摘要
摘要是課題研究的內容提要和研究成果的簡短總結,能直接說明研究的問題、方法、過程和主要結論。使讀者看了摘要后能了解結題報告的概況,以決定是否值得閱讀全文。摘要撰寫要短小精悍、準確完整、嚴謹流暢,一般不要越過300字。
⒈⒊研究背景
研究背景又稱提出問題、前言、引言,這是研究報告的開頭部分 ,其重點是提出研究問題和研究假說。引言的邏輯結構為:闡述問題的前后聯系提出研究問題形成研究假說。其主要內容:⑴介紹研究背景和目的,闡述前人在這方面的研究成果、尚未解決的問題及研究進展。⑵簡介本課題的研究方法。⑶概述本課題研究成果的理論意義和現實意義。
⒈⒋正文
正文是研究者表達研究成果和研究過程的主體部分,在研究報告中占絕大部分篇幅。要求詳細闡述本課題所采用的研究方法、過程,說明產生結果的條件及相關因素,對一些不容易了解的地方要給予明確的解釋。正文主要包括方法、結果和討論三部分。
⒈⒋⒈方法
研究方法是研究報告的主體部分之一,其主要內容包括:①對課題出現的主要概念的定義與闡述。②研究對象的條件、數量、取樣方式及研究的時間安排。③各變量間的關系分析。④研究的操作設計與研究成效的比較方式。這部分內容與方案設計中的“研究方法與研究過程”基本相同,其實就是將設計方案在研究實施中的調整說明[2]。
我國高中學生的壓力源主要來自于學習、父母、老師和同伴、環境、自我發展和時間六方面,其中學習壓力是中學生的主要壓力源。而高中生的升學壓力要比高中生大,這是因為高中畢業面臨的升學和擇業更為迫切。
在社會中還存在不少高中生由于學習壓力無法得到調節而釀成悲劇。一幕幕扣人心釀成悲劇,一幕幕扣人心弦的畫面,種種悲劇也給許許多多的家長心靈造成難以抹去的傷痛。所以為了進一步了解學習壓力給學生帶來的影響.
一、自我減壓法:
面對學習和工作力而產生的種種心理上的問題,可借助以下方法自我調解。
1、不要把目標定得高于自己能力所及。
2、有效地分配時間,將學習任務或工作任務按輕重緩急編定先后次序,然后依次逐步完成,階段性的成果可減低同時展開多份任務而又無法完成所帶來的壓力。
3、課余時應做適量運動,既可強健身體,亦可減壓,或可在教室做一些簡單的伸展運動,減輕肌肉疲勞。
4、遇到困擾或情緒低落時,可與家人或朋友傾訴,通過與同學,同事的溝通獲得支持和關懷,亦可發泄情緒,以下提供兩種心理宣泄FLASH,可點擊下載
5、即使再忙,也要有必要而充分的睡眠,這對松弛繃緊的神經至關緊要,對于處在身體發育時期的學生來說尤為重要。
6、如果實在感覺壓力太大,無法應承致使情緒低落,不妨去聽聽CD,看看電視劇,或者到酒吧去坐一坐,哪怕偶爾“瘋狂”消費一把也可以。當然這是一種矯枉過正的辦法,不可頻頻使用,更不能成為你懶惰渙散的借口。
7、養成持之以恒,平衡有序的生活習慣,不要做“書呆子”,別放棄享受美食,享受戶外活動或發展個人興趣所帶來的樂趣。
二、病癥的心理調適
如果面對學習壓力造成的種種生理上的不適,可借助以下辦法使之得以緩解。
1、頭痛:以拇指輕按太陽穴,眉頭及耳背等部位,再以畫圓法輕輕按壓。
2、肌肉痛楚(如肩部及腰部不適):可做一些簡單的伸展動作,坐直身子,放松肩部,兩手放背后,十指互扣然后用力向后拉,如此這般重復多次。
3、胃痛:因耽誤進餐時間引起胃痛,可喝一點溫牛奶,這個時候千萬不要求助于茶或咖啡等刺激性飲料。
1、制定有效的課題實施方案。
20*年8月,各課題實驗學校就課題研究制定了方案,成立了課題領導小組,建立了各具特色的課題管理模式。組建了一支實驗隊伍,要求課題組成員熱情高,干勁足,既有較高的理論水平,又有豐富的教學經驗。確保實驗的順利進行,有利于經驗的總結,有利于教研成果的推廣。
2、學習有指導性的教育教學理論。
轉變教育觀念是進行課題實驗的前提。我們組織實驗教師學習《中國教育改革和發展綱要》和《九年義務課程標準》,組織開展為期一個月的“教育思想大討論活動”,撰寫心得體會。采取了“課內與課外、集中與分散”相結合的形式,由指定的教師進行授課,主要講述探究性學習課程的性質、目的要求、如何選題、設計調查問卷和訪談提綱、資料的收集、整理和分析、聘請指導老師、撰寫報告等,并指導學生選題和開展課題研究。沒有固定課時安排,但每學期每位語文教師必須完成1—2個指導學生進行探究性學習的方案或教案,以及開展探究的結果報告或情況報告。其目的是使更多的教師參與和關注探究性學習,使探究性學習課題研究和探究性學習的方式滲透到教師的教學過程中和學生的學習過程中,“自主合作探究”不僅是學習方式,而且是一種深層次的教學理念。樹立二種觀念,實現三種轉變。首先應樹立一切為了學生的價值觀、全面依靠學生的行為觀;其次應變“教案”為“學案”、變“教本”為“學本”、變“教學”為“學教”。
3、研究有特色的課堂教學模式
我們在多年實踐的基礎上,結合我區學生實際,構建了“自主預習——導入激趣——自主探究——合作互動——質疑問難——拓展遷移”的自主、合作、探究性的課堂教學模式框架。營造樂學氛圍,激發探究興趣。教師要營造平等、民主、和諧、輕松的課堂氣氛,減輕學生學習上的負擔,使學習成為一種樂趣,從而使學生的自主性得以發揮。調動學生的知識儲備,激發學生自主探究的興趣,提供充足時機,引導自學探究。讓學生把學、思、疑、問連結在一起,學有所思、思有所疑、疑有所問,從而獲得更多的自主探究的空間和學習主動權,在主動探究的實踐過程中掌握新知,培養創新能力。同時注重疏導點撥,學會合作探究。生生合作、師生合作、小組合作、全班合作。抓住中心議題或關鍵性問題,讓學生各自發表見解,集中解決難點。要讓學生與學生之間對話、答辯、爭論,讓學生在爭辯中碰撞出智慧的火花,在質疑解惑中明晰努力方向,強化學生的合作學習。探究課堂注重激勵評價,引導深入探究。對學生積極主動參與探究給予充分肯定,并得出結論,為學生今后解決類似或相關問題導向指路。讓學生牢記探究的方法,養成自主探究的習慣,把學習探究變成自己生活的第一樂趣。同時,引導學生到圖書館、閱覽室,到社會生活中去探究,給學生更多讀書、動腦、動手、實踐、探究的機會,培養出有思維有能力的創造型人才。
4、探究有價值的教學方法
經過廣大語文教師的精心探索,我區在實施語文探究性學習課題方面摸索出多種探究性教學模式,具體如下:
(1)問題探究法。讓學生在閱讀過程中針對文本的特點及學生的自身經驗,發現問題,采用類比生疑法、聯想生疑法,異同對比法、借果推因生疑法等,自己提出問題,并自主探究或對教師提出的問題,進行探究和解決。探究問題的過程也就是提出問題并解決問題的過程,在探求過程中要總結規律、培養技能。
(2)情境探究法。創設探究性學習的情境,創造一種寬松、自主的學習環境,讓學生在民主的、和諧的、平等的氛圍中進行探究性學習,有助于興趣提高和知識的掌握。
(3)自主探究法。在自主學習過程中,給學生充分的自學時間,讓學生自己去讀書、去感悟、去探究。強化學生的自主閱讀意識,讓學生這個閱讀主體獨立領受和駕馭文本。
(4)合作探究法。合作探究如果用在刀刃上,能激發學生探究學習的興趣,有利于發揮每個人的長處。如在教學重點難點處,組織學生分成小組或全班集體合作探究,對閱讀寫作等整體性的學習內容,組織整節課探究學習……這樣同學間相互彌補、借鑒、相互啟發、撥動,形成立體的交互的思維網絡,實現個性差異互補,使學生在合作中競爭,在交流中發展,在探究中提高,就能產生1+1>2的效果。
(5)想像探究法。對于一些寓言、神話及有想象空間的小說、戲劇等,將學生語文學習由探究現實存在的問題引向探究虛構虛擬假設存在的問題。
(6)縱橫探究法。既從課文間的聯系從縱向橫向兩方面進行問題探究,獲取知識。
(7)接受式探究法。根據文本需要,讓學生對個人、學校、社會等現有資料或現有資源中直接搜集或詢問得來。既豐富了學生的知識積累,又培養了學生收集、整理資料的能力。
(8)發現式探究法。在發現式的探究學習中,沒有現成的信息可以直接搜集到,而必須由探究者對文本經過閱讀、分析、解讀、研討等活動過程,通過知識間的鏈接來獲得認識成果。
還有一些有效的探究性學習方法,如口語交際課的情境探究法——它要求教師要創設探究性學習的情境,創造一種寬松、自主的學習環境,讓學生在民主的、和諧的、平等的情感化學習氛圍,進行探究性學習的課堂充滿著情感的碰撞、情緒的體驗、生命的交流;寫作課的合作探究法——將探究性學習引入作文評改課堂,全班學生按優、中、差均勻搭配分成若干小組,每組4人,確定一名學生作記錄人,小組集體討論評改分配的作文,評改內容按照本次作文要求(包括作文是否說了真話、抒了真情以及在擬題、審題、立意、構思、謀篇布局、寫法、語言等方面的優點、不足、修改意見),然后小組代表在全班匯報評改情況,小作者根據小組評改的意見寫出二稿,組長根據小組成員在本次作文的表現,給每個人評定等級,并負責把集體討論的內容、素材、初稿、修改意見、二稿等材料按順序裝訂好,交教師審閱或各小組交換評改;活動課的體驗探究法——如學生在綜合性探究學習中獨特的感受、體驗和理解。學生在探究過程中體驗了成功,也體驗了挫折。探究過程中的挫折、錯誤、彎路甚至失敗,對學生都具有重要的教育價值。對此,教師要適時給予適當的幫助、引導,從而使探究在經歷了一段努力之后有所結果,讓學生體驗到有所收獲的喜悅和興奮。
二、研究的目標
本課題研究旨在對初中語文自主、合作、探究主題活動教育的理論與實踐兩個層面進行研究,探索科學的、有效的課堂教學模式和培養學生自主合作探究的有效途徑,以加強學生自主探究能力和合作創新精神的培養。
1、通過本課題研究,探索初中生自主合作探究主題活動教育的主要特點及有效途徑。
2、學會學習、學會探究、學會合作、學會創新。要鼓勵和幫助學生自己探究問題,探索解決問題的方法,尋找答案;要鼓勵和幫助學生在探究之中嘗試采用不同的方法,探索適合于自己的獲取新知和能力的途徑,高效地達成學習目標。
3、構建進行自主合作探究、創新的知識體系,形成實施自主探究教育的能力,提高教師的科研水平。
三、課題研究的成效
四年來,我們在課堂教學、綜合性學習活動等方面進行了探索、實踐,取得了一定的成效。
1、通過研究,學生對語文學習興趣增強了。
正如蘇霍姆林斯基說:“人的心靈深處都有一種根深蒂固的需要,這就是希望感到自已是一個發現者、研究者、探索者。開展研究后,在教學中注重創設自主探究的情境,激起學生的求知欲望,打開了學生思維的閘門,使學生進入“求通而未通,欲言而未能”的境界,增強了學生的學習內驅力,學生的學習由被動接受到積極參與,主動探究。
2、自主合作探究意識明顯增強。
學生能積極主動地投身于各種自主探究地學習實踐活動中,課前預習已不必由教師作專門的指導,只須按照掌握的預習方法進行就行了。有些學生還超前預習;在學習中主動出主意、想辦法,解決疑難問題;在許多公眾場合,一些以前躲于人后、怕拋頭露面、羞于啟齒的學生也開始有了探究的欲望、交往的愿望、展示自我的渴望。課外閱讀更是深入學生的心,大語文學習觀已滲入到每位學生的心坎。
3、自主探究能力明顯提高。
學生在學期初能認真分析自己的學習實際,確立了自己的奮斗目標,明確學習目的、內容和高度,并據此制定出自己的學習計劃,探索自己的學習進程和方法,在學習過程中,能積極主動地進行各種學法的嘗試和探索,并及時作出自我評價,了解自己的學習現狀,反思現狀,總結經驗教訓,進行學法的改進,學習狀態的調整,使自己始終處于一種學習的興奮狀態,努力實現現代語文教育的鼻祖葉圣陶先生曾說:“嘗謂老師教各種學科,其最終目的在達到不復需教,而學生能自為研索,自求解決,故老師之為教,不在全盤授與,而在相機誘導。”
4、自主探究習慣初步養成。
我國早在春秋時期就有“博學之,審問之,慎思之,明辨之,篤行之”的教學主張,在課題研究中,學生已初步養成了自主預習、復習的習慣,樂思善辯的習慣,勤翻工具書的習慣,博覽群書、廣泛攝取信息的習慣,自疑解疑的習慣。
5、自主探究教育觀念深入師心,加快了語文課堂教學素質化進程。
幾年來的實踐許多教師覺得最大收獲是教育觀念的自我轉變。如今我區初步探索出了幾種比較成熟的課堂教學結構模式,如探究式、討論式、情境式。
6、提高了教科研能力。
教科研是提高教師業務素質的捷徑。從前“教科研”充滿了神秘、神圣,覺得遙不可及,可親密接觸之后,才發現科研就在我們身邊,科研是為了解決存在的實際問題,初步知道了課題研究的步驟和方法,自覺自愿投入學習中,知識面大大加寬,分析處理信息能力大大加強,還撰寫了有價值的心得和教案。參與科題研究的教師有200多項成果在市級以上獲獎或發表,可謂成果頗豐。
四、思索與反思
通過課題的研究和實踐,我們雖然取得了不少成果,但也還存在著不少問題,需要進一步探究和解決。
1、新的教學方式,舊的評價標準。
探究性學習課程的評價強調過程性評價。關注過程的評價,是面向“未來”、重在發展的評價。開設探究性學習課程的作用和積極效果還受到很大制約。真正意義上的社會、家長、教育行政部門對學校的評價,學校對老師教學的評價,學校、老師、家長對學生的評價,對學生學習能力的評價的觀念還沒有根本改變。探究性學習課程的評價,沒有真正納入學生整體評價體系中。評價觀念不從根本上改變,就會導致學生只重結果,忽視過程,就不可能促使學生注重科學探究的過程,養成科學探究的習慣和嚴謹的科學態度與精神,反而易于形成一些似是而非的認識和習慣,不利于學生良好思維品質的形成,限制學生解決問題的靈活性和創造性。
2、教學相長,教師滯后。
探究性學習課程倡導的是民主、開放、科學的課程理念,教師必須在課程改革中發揮主體性作用。初中語文“探究性學習”給教師的教學機智提出了更高的要求,對學生的反饋要有恰當的反應、判斷和處理能力。由于對學生探究反饋結果的不確定性,對教師的備課也提出了更高的要求。教師把學生思維能力培養的主戰場放在學科教學中,探究性學習課程的優勢還沒有充分發揮出來。
3、缺乏整合,有待提高。
在學生探究活動上,教師的講授多,學生思考探討形式大于收獲。強求一致多、發展個性少;死記硬背多、鼓勵創新少。學習方式依然單一,阻礙個體終身學習能力的發展。在閱讀上,學生讀書缺乏自己的感悟和探究。在課堂探究時,學生缺乏充分的讀書時間,小組合作探究流于形式,學生未能真正產生自己的感受和看法,導致探究不夠深入。還有在寫作上,擬題和指導構思沒有給學生的自由寫作、自由表達、自由探究提供必要的條件和廣闊的空間,寫作題目沒有特色,構思內容過于狹窄,且忽視了學生在修改環節上的個性化表達和探究創造。如何處理好課堂氣氛活躍與“知識目標”落實之間的矛盾;怎樣引導學生走出校外進行有效的大語文探究;如何建立全面評價教師、學生的體系等均是擺在我們面前的任務。
1 現代中醫對熱毒致中風病機的認識
近年來,“熱毒致中風”理論在中風發病中越來越受到重視。中醫腦病研究所所長王永炎院士指出:毒邪致病是中風病情險惡,難以治愈的關鍵。
中風病的發生,因氣候驟變,煩勞過度,情志相激,跌仆努力等因素引起,其中情志因素占非常重要的地位。中風病的發生,可因氣候驟變、煩勞過度、情志相激、跌仆努力等因素引起,其中情志因素占有非常重要的地位。朱丹溪說:“五臟各有火,五志激之,其火隨起”即不良的情志刺激,可導致臟腑功能失常,火熱內生。如情志內傷,肝郁化火;勞心太過,暗耗心陰,日久使心陽相對亢盛而發為心火。肝火、心火相激相助,加之中風患者多為年老體衰,肝腎陰虧之人,火無所制,導致火熱內熾。火熱煎熬熏蒸,煉血為瘀;與血相搏,結而留絡為瘀;傷津耗液,陰傷血滯為瘀;損絡迫血,血妄離經為瘀。火熱一樣可煉液為痰,津液為之痰聚。形成痰、瘀、熱同病。龔居中在《紅爐點雪》中說:“火為痰之本,痰為火之標。”王清任亦說:“血得熱則煎熬成塊。”
火熱、痰瘀膠結,伏于體內,若不能及時、不斷地清除于體外,即可成熱毒。火熱、痰濁、瘀血之間相互促進,共同構成熱毒犯腦的病理基礎,形成腦絡損傷的惡性循環狀態。可見,熱毒是中風病發病中的關鍵因素之一。
現代不少醫家通過廣泛實踐,對中風病因病機發病機制,中醫證候特點等都提出了許多有益的見解和認識。劉衛紅認為,中風病雖與外來毒邪無明顯關系,但其發病后所形成的內毒卻直接影響著疾病的病理變化,預后和轉歸。內生毒邪具有毒性火熱,毒性猛烈,依附性以及敗壞形體,易攻臟腑等特點。毒邪致病力強,給機體造成危害重,且內毒一旦形成,便迅速加重病情,是產生變證及危害癥狀的重要原因。毒邪致病的癥狀多屬火熱,火可生毒,毒具火性,毒與火密切相關。內毒的最大特點就是敗壞形體,損傷臟腑經絡。中風病毒邪除損傷腦絡外,同時侵犯其它多個臟腑,如毒人于心則致昏迷,人于腸腑則大便干結。因此,內毒在中風病急性期的作用是不可忽視的。
2 清熱解毒法在臨床的應用
以清熱解毒法治療中風臨床報道較多,如鮑益銘用黃連解毒湯治療腦血管病45例,總有效率62.2%。其作用機理重在祛除熱毒病邪。黃連解毒湯集苦寒于一方,正是針對熱毒病邪而設,療效顯著,反證了中風病中毒邪的存在。張建平,王心光亦將黃連解毒湯用于中風急性期的搶救,臨床取得滿意的療效。林亞明更強調了出血性中風的內毒致病因素,他認為出血性中風病發后,瘀血、痰濁、熱邪偏盛,雍滯體內不得外泄,則化毒邪。內毒具有毒性猛烈,善變,易攻臟腑而多屬火熱之特點。能導致臟腑功能失常或損害臟腑器官,尤其是損壞腦質,甚至導致死亡。林亞明在臨床上用解毒法治療出血性中風,取得良好的療效。
現代醫學在對腦血管的研究中,尤其是近年來分子基因技術的發展,逐漸認識到出血性中風病發生與免疫炎癥機制息息相關,存在著自由基,興奮性氨基酸,一氧化氮,細胞因子(腫瘤壞死因子,白介素)物質過度產生,直接或間接轉化為毒性物質,損傷組織細胞。上述諸方面的變化,具體反映了熱毒內生,引起腦受損的生物學基礎,表現出類似中醫“熱毒”癥候,可歸于中醫“毒邪”范疇。
目前,中風的“內生毒邪”的論斷,臨床病案報道較多,但實驗研究不多,應加強這方面的研究。
3 高血壓腦出血與白細胞趨化相關性研究
高血壓性腦出血的機體細胞免疫和體液免疫反應均有明顯變化,如腦出血后血漿和腦脊液炎性細胞因子水平增高,病變局部白細胞浸潤。近年來,特別隨著對腦出血損傷機理的研究深入,白細胞的損傷作用倍受關注。出血后白細胞在腦組織中聚集并釋放出某些炎性物質,導致出血周圍組織產生缺血和炎癥反應,參與水腫形成和發展。這種繼發于腦出血的炎性過程是出血性腦損傷的重要部分,對損傷的最終范圍和程度有很大影響。深入了解這種炎癥反應的發病機理,時間過程,影響因素和病理作用,有助于為治療急性腦出血損傷提供新的思路和途徑。
【摘要】 目的 研究中藥制劑怡欣樂口服液(YXL)的安全性評價和升高外周白細胞的作用機制。方法 按照新藥審批辦法有關規定,分別運用小鼠和大鼠進行了YXL急性和長期毒性實驗;分別采用環磷酰胺、苯中毒及60Co-γ輻射等因素誘發小鼠外周血白細胞總數低下運動模型,觀察YXL對模型小鼠外周血白細胞數的影響。結果 以最大濃度、最大體積的YXL給小鼠口服灌胃,每天1次,最大耐受量為35.6g/kg。大鼠給藥60天后,高劑量組白蛋白,高、中劑量組總膽紅素明顯下降,與對照組比較差異有顯著性;高、中劑量組的總膽固醇有下降趨勢,但與對照組比較差異無顯著性;停止給藥15天,各項指標均在正常值范圍內與對照組比較無差異;給予YXL 3g/kg、2g/kg和1g/kg 3個劑量的藥物干預后,3個給藥劑量均能提高以上3種誘因所致小鼠外周血白細胞總數低下。結論 YXL以灌胃給藥測得最大耐受量為35.6g/kg,接近臨床劑量的200倍;長期毒性的各項指標均在正常值范圍內與對照組比較無差異; YXL具有明顯升高血白細胞作用。本實驗YXL臨床運用提供了安全性評價依據和藥效學方面的實驗依據。
【關鍵詞】 怡欣樂口服液;安全性;白細胞;大鼠;小鼠
[Abstract] Objective To evaluate the safety of YXL oral liquid and to study its mechanism in increasing the WBC in peripheral blood.Method According to the regulation for new drug application, mice and rats were applied for the acute and long term toxic experiment; dynamic low peripheral blood WBC in mouse and rat model were build up by toxic treatment of cyclophosphamide, benzene, and the 60Co-γray irradiation, then the effect on WBC in peripheral blood were observed.Result YXL oral liquid was feed to the mice by gastric perfusion with the maximum concentration and volume, once a day, maximally tolerated dose is 35.6 g/kg. The albumin in the high dosage group and the total bilirubin in the high and medium dosage decreased obviously in rat after the drug was feed for 60 days, which had obvious difference with the control group. The total cholesterol in the high and medium had the trend of decrease, but didn’t have obvious difference with the control group. The treatment of all three different dosage, YXL 3 g/kg,2 g/kg and 1 g/kg could improve the low WBC in peripheral blood of the 3 mouse models.Conclusion The maximum tolerance dosage of YXL oral liquid by gastric perfusion is 35. 6 g/kg, which was about 200 times than the clinical dosage. All the indexes for the long term toxicity are in the normal range which had no difference compared with the control group. YXL has an obvious effect in increasing the amount of WBC. This research provided experimental evidence for the safety evaluation and pharmacodynamics in the clinical application of YXL.
[Key words] Yixinle oral liquid;safety;white blood cell;rat;mouse
YXL是由我們在補腎填精,養心安神治法指導下,選用西洋參、冬蟲夏草、阿膠、何首烏等藥物,采用現代制藥技術研制而成的中藥復方制劑。為了研究YXL在用藥安全性評價和升高外周白細胞方面的機制,我們按新藥審批辦法有關規定,進行了YXL急性毒性和長期毒性及升高外周白細胞方面實驗研究,現將結果報道如下。
1 YXL毒理學研究
1.1 材料與方法
1.1.1 材料
1.1.1.1 藥物及試劑 YXL,由總醫院藥劑科制劑中心提供(每1ml相當于生藥1g),批號:080618;環磷酰胺(CTX),粉針劑,200mg/瓶,上海華聯制藥有限公司產品,批號:070318;苯,純度為99.5%,北京北化精細化學品有限責任公司,批號:080618。
1.1.1.2 儀器 血液分析儀,MZK-5108K,日本光電工業株式會社產品;60Co遠距離治療機,型號:GWXJ80,中國核動力研究設計院產品。
1.1.1.3 動物 昆明種小鼠,SPF級,各半,體重(20±2) g,Wisar大白鼠,SPF級各半,體重(100±10) g,由總醫院實驗動物中心提供,合格證號:粵檢證字第2006B020號。
1.1.1.4 統計方法 實驗數據應用SPSS軟件進行方差分析,F檢驗。各組間均值比較采用q檢驗。結果用均數±標準差(x±s)表示,顯著性水準及結果判斷按通用的假設檢驗標準。
1.1.2 方法
1.1.2.1 小鼠急性毒性試驗 取小鼠20只,各半,于實驗前一天隔夜禁食不禁水,在(20±2)°C的條件下, ig給藥。藥物濃度為1g/ml(最大濃度), ig體積為0.5ml/20g體重(最大體積),觀察7天。
1.1.2.2 大鼠長期毒性試驗 取大鼠80只,按體重隨機分組,分為空白對照組、YXL的低、中、高劑量組(為臨床的20、40、60倍), ig給藥,每天1次,連續60天。最后1次給藥24h后,每組取12只大鼠的血液做血液學(紅細胞RBC,白細胞WBC,血紅蛋白Hb,血小板PC,白細胞分類DC)和血液生物化學(尿素WB,肌酐GREA,葡萄糖GLU,總蛋白TP,總膽紅素T-BIC,天門冬氨酸氨基轉移酶AST,丙氨酸氨基轉移酶ALP,堿性磷酸酶ALT,總膽固醇T-CHO)。取出心、肝、脾、肺、腎、胃、腎上腺、胸腺、子宮、,精密稱重,計算臟器系數和病理檢查。15天后,剩余的8只大鼠進行同樣實驗。
1.2 結果
1.2.1 YXL小鼠急性毒性試驗 藥物濃度為1g/ml(最大濃度), ig體積為0.5ml/20g體重(最大體積),給小鼠灌以YXL 20min后,小鼠略微不適,表現為腹脹、弓背、安靜不動等現象, 3 h后恢復正常;在觀察期間,全部小鼠存活,剖檢,肉眼觀察主要臟器,未見心、肝、脾、肺、腎等主要臟器組織明顯異常。YXL以灌胃給藥測得最大耐受量為45.6g/kg,接近臨床劑量的200倍。
1.2.2 YXL大鼠長期毒性試驗
1.2.2.1 YXL對大鼠體重的影響 大鼠在實驗期間活動、飲食、體重與對照組比較無差異。
1.2.2.2 YXL對大鼠外周血象的影響 連續ig給藥60天及停止給藥15天檢測血液學(紅細胞RBC,白細胞WBC,血紅蛋白Hb,血小板PC,白細胞分類DC)均在正常值范圍內,與對照組比較無差異。
1.2.2.3 YXL對大鼠血液生化學的影響 連續ig給藥60天,尿素、肌酐、葡萄糖、總蛋白、天門冬氨酸轉換酶、丙氨酸氨基轉換酶、堿性磷酸酶、總膽固醇均在正常值范圍內與對照組比較差異無顯著性;但高劑量組白蛋白,高、中劑量組的總膽紅素明顯下降,與對照組比較差異有顯著性;高、中劑量組的總膽固醇雖有下降趨勢,但與對照組比較差異無顯著性。提示:長期服用YXL,對其白蛋白、總膽固醇的代謝有一定作用,停止給藥15天檢測血液生化學各項指標均在正常值范圍內,與對照組比較無差異。
1.2.2.4 YXL對大鼠臟器系數的影響 連續ig給藥60天,每組股動脈放血處死12只,剖檢,仔細觀察是否有肉眼可見病變,并迅速摘取心、肝、脾、肺、腎、胃、胸腺、腎上腺、子宮、稱重,并折算成100 g體重臟器重量(臟器系數)。結果:僅高劑量組肝臟的臟器系數與對照組比較差異有顯著性,停藥15天,臟器的臟器系數與對照組比較無差異。
1.2.2.5 組織學形態檢查 光鏡檢查大鼠的心、肝、脾、肺、腎、胃、胸腺、腎上腺、子宮、各個臟器未見異常。
2 YXL升高外周血白細胞研究
2.1 材料 藥物及試劑、儀器、動物均與毒理學研究介紹一致。
2.2 方法與結果
2.2.1 YXL升高環磷酰胺誘發小鼠外周血白細胞總數低下作用[1,2] 實驗設5組,每組12只,分別為空白對照組;模型對照組;YXL 1.0g/kg組;2.0g/kg組;4.0g/kg組(分別簡稱為YXL 1、2、3組)。各組均ig給藥,1次/d,共13天。YXL 1.0g/kg、2.0g/kg和4.0g/kg 3個劑量組分別以臨床成人日劑量(0.10g/kg)的10倍(1.0g/kg)、20倍(2.0g/kg)及40倍(4.0g/kg)。于給藥第7天除空白對照組外其余各組均ip環磷酰胺100mg/kg 1次,于第10、13天給藥后1h(即ip CTX后第3、6天),尾靜脈取血,測定白細胞總數。研究數據均以(x±s)表示,采用組間t測驗進行統計學處理。結果:與模型對照組比較,給環磷酰胺后第3天,YXL 1.0g/kg、2.0g/kg及4.0g/kg組白細胞總數均明顯升高見表1。表明YXL具有升高免疫抑制劑環磷酰胺誘發小鼠外周血白細胞低下作用。表1 YXL升高環磷酰胺誘發小鼠外周血白細胞總數低下作用注:與模型組比較,*P
2.2.2 YXL升高苯中毒小鼠外周血白細胞總數作用[3] 實驗前預選小鼠尾部取血,測定外周血白細胞總數,取WBC總數值在(10~12)×109/L的小鼠供實驗造模之用。小鼠sc 99.5%苯5ml/kg染毒,1次/d,連續5天,取血測定小鼠WBC總數,當小鼠WBC總數降至50%~60%時,被認為造型成功。然后,按小鼠WBC總數均分為4組,每組12只鼠,分別為:苯染毒模型組;YXL 1.0g/kg組;YXL 2.0g/kg組; YXL 4.0g/kg組。各組小鼠繼續sc苯染毒5天(共染毒10天),于第7次染毒同時,YXL各組分別每天ig給藥1次,連續15天。于第8、15天給藥后1h取血測定WBC總數。研究數據均以(x±s)表示,采用組間t檢驗進行統計學處理。結果:與模型組比較,YXL ig 8天2.0g/kg、4.0g/kg,ig 15天1.0g/kg、2.0g/kg和4.0g/kg組均能明顯升高苯中毒小鼠所致外周WBC低下作用。表明YXL具有升高苯中毒小鼠外周血白細胞低下作用。
2.2.3 YXL升高60Co-γ輻射誘發小鼠外周血白細胞總數低下作用[4] 實驗前所有實驗鼠尾部取血,測定外周血白細胞總數,篩選WBC總數值在(10~12)×109/L的小鼠供實驗造型之用。小鼠隨機分為5組,每組12只,分別為:空白對照組;60Co-γ損傷模型組;YXL 1.0g/kg組;YXL 2.0g/kg組;YXL 4.0g/kg組。除空白對照組外其余各組給予1次 60Co-γ全身照射,劑量480Rad/8min(59Rad/min),距離為80cm。照射后當天ig給予YXL,1次/d,連續21天,每周稱重1次,調節劑量。各組均于照射7、14、21天給藥后1h尾靜脈取血測定白細胞總數。研究數據均以(x±s)表示,采用組間t檢驗進行統計學處理。結果:與模型組比較,照射(給藥)7天,YXL 4.0g/kg組白細胞總數明顯升高;給藥14天,4.0g/kg及2.0g/kg組白細胞總數明顯升高;給藥21天,4.0g/kg、2.0g/kg及1.0g/kg組白細胞總數均明顯升高。
3 討論
中醫學認為慢性疲勞綜合征屬于“虛勞”病范疇,而且慢性疲勞綜合征更是亞健康狀態的典型臨床表現之一,研發中藥新藥制劑治療慢性疲勞綜合征,具有非常重要的臨床意義。 YXL臨床上用于慢性疲勞綜合征的治療,取得了比較滿意的療效,同時獲得國家發明專利和聯勤部衛生部醫院制劑批準文號。本實驗結果顯示,YXL的急性毒性和長期毒性實驗,以最大濃度、最大體積的YXL給小鼠口服灌胃,1次/d,最大耐受量為45.6g/kg。給藥60天后,高劑量組白蛋白,高、中劑量組總膽紅素明顯下降,與對照組比較差異有顯著性;高、中劑量組的總膽固醇有下降趨勢,但與對照組比較差異無顯著性;停止給藥15天,各項指標均在正常值范圍內與對照組比較差異無顯著性,為YXL臨床應用提供了毒理學依據。
環磷酰胺是臨床常用的化療藥,但其在殺傷癌細胞的同時,也對人體產生不同程度的毒副作用,其中主要有骨髓抑制和免疫功能低下,造成白細胞減少癥。從本研究結果可以看出,YXL具有升高免疫抑制劑環磷酰胺誘發小鼠白細胞低下作用。據資料報道[5],苯可能直接抑制造血細胞核的分裂,從而影響骨髓的造血功能,對機體造血器官有明顯的毒性作用,可使外周血白細胞顯著降低。本實驗通過苯中毒引起白細胞數降低的小鼠動物模型,證明YXL具有明顯的升高白細胞的作用。60Co-γ照射后對正常組織可產生電離輻射損傷,造血系統是電離輻射主要靶器官之一,敏感性高,輻射后容易導致骨髓功能損害,表現為外周血全血象減少,嚴重者可致骨髓干細胞或基質細胞受損,發生輻射損傷后再障。本研究還表明,YXL對60Co-γ輻射誘發小鼠外周血白細胞總數低下均有明顯升高作用。以上三類白細胞減少動物模型實驗表明,YXL具有明顯升高白細胞減少癥模型小鼠白細胞數的作用,為YXL臨床推廣應用于白細胞減少癥提供了實驗依據。造血系統的各個環節是相互聯系的,藥物對于造血系統的作用也可能是多環節和多途徑的,YXL進一步的藥效與機制探索還在進行中,期待新的發現。
參考文獻
1 沈海中,刁東海,趙文明,等.MPS對環磷酰胺作用的小鼠白細胞的影響.首都醫學院學報,1994,15(2):103-105.
2 陳書明,聶向庭,劉桂林,等.鹿茸醇提物對白細胞減少動物模型影響初探.實驗動物科學與管理,1999,16(4):32-34.
3 張強,林立,張凱,等.Ge-132對人工誘導小白鼠苯中毒造血功能影響的初步研究.濟寧醫學院學報,2000,23(1):42-43.
關鍵詞:居民;中老年;高血壓;行為習慣
中圖分類號:R544.1 文獻標識碼:A 文章編號:1006-3315(2015)06-182-001
近30年的研究顯示,我國人群心血管病(主要是高血壓、冠心病和缺血性腦卒中)的發病率和死亡率逐年上升,發病年齡提前,已成為我國最重要的公共衛生問題之一。深入研究中老年人群高血壓患病的相關影響因素,闡明各因素對高血壓的作用,有助于識別高血壓的發病機制,對開展中老年人群高血壓的防治工作有重要意義。為了探討保定社區中老年人群高血壓的流行現狀和行為習慣等影響因素,以便幫助社區機構根據其流行特點,制定切實可行的基層防治對策,達到預防和控制高血壓的目的。
1.對象與方法
1.1調查對象
于2014年11月按照簡單隨機抽樣的方法對河北省保定市紅陽小區的居民進行調查,在該小區隨機抽取70個住戶,每戶中所有年齡為45歲及以上、精神狀況正常、愿意配合調查的成年人均作為調查對象。
1.2調查方法
通過查閱相關文獻和資料,自行編制調查問卷,主要內容包括:基本情況、高血壓患病狀況以及相關行為習慣。由經過統一培訓的調查員,采用入戶問卷調查的方式指導調查對象匿名填寫問卷,現場發放并回收,共收回有效問卷172份。
1.3統計分析
應用Epidata3.1軟件建立數據庫,采用雙錄入方式錄入調查數據,使用SPSS19.0軟件進行統計學分析,對相關數據進行描述性統計和x2檢驗,P
2.結果
2.1基本情況
本次調查對象共172人,其中高血壓患者為57人,該社區高血壓現患率為33.14%。其中男性80人(46.51%),女性92人(53.49%);年齡45-86歲,平均年齡(65.87±11.32)歲。
2.2飲食習慣與高血壓
經常吸煙和飲酒的中老年人群高血壓患病率高于相關對照組,差異有統計學意義,見表1。
3.討論
本次調查顯示,該社區高血壓現患率為33.14%,高于賴麗芳等人(24.9%)的研究結果。可見該社區中老年人群的高血壓現患率較高,應當引起社區衛生部門的注意,防治中老年人群高血壓病的惡化。
經常吸煙和飲酒的中老年人群高血壓患病率高,這與國內既往其他研究者的結論相一致。有研究表明,煙草中的尼古丁、焦油等有害物質在被人體吸收后會顯著地影響機體心血管的功能與結構。與此同時,吸煙還會使機體甘油三酯與總膽固醇處于異常狀態,從而降低高密度脂蛋白的水平,從而有引發高血壓的風險。
【關鍵詞】 hiv1; hiv血清陰性; t淋巴細胞亞群
study on the expression and activation of t lymphocyte subsets in highly exposed hiv1 but persistently seronegative individuals by sexual transmission wang yueyun1,2, wang xiaohui3, cheng jinquan3, peng ji4, chen lin3, shi xiangdong3, nie shaofa1. 1.department of epidemiology and statistics, school of public health, tongji medical college, huazhong university of science and technology, wuhan 430030, china; 2.medical college of yangtze university, jingzhou 434000, china; 3.shenzhen center for disease control and prevention, shenzhen 518020, china; 4.shenzhen municipal chronic disease hospital, shenzhen 518020, china
【abstract】 objective to understand the distribution and immune activation status of t lymphocyte subsets in highly exposed hiv1 and persistently seronegative (heps) individuals, and explore the immunologic mechanism of nonsusceptibility to hiv1 by sexual transmission in heps individuals. methods fresh peripheral venous blood was collected from 37 heps, 65 hiv1infected individuals and 128 healthy controls. four colors flow cytometry was used to detect the distribution of t lymphocyte subsets and expression of hladr, cd38 on cd4+ t cells. results cd4+ counts, cd4/cd8 ratio were higher in heps individuals and healthy controls than those in hiv1infected individuals (p<0.001), but cd8+ counts were significantly lower in the two groups than those in hiv1infected individuals (p<0.001); percentages of cd38+/cd4+, hladr+ cd38+/cd4+ were significantly lower in heps and healthy controls than those in hiv1infected individuals (p<0.001). meanwhile, the percentage of hladr+ cd38+/cd4+ in heps individuals was lower than that in healthy controls (p<0.05). the percentage of hladr+/cd4+ in heps individuals was significantly lower than that in hiv1infected individuals and healthy controls (p<0.001). conclusions the expression of activation antigen marker hladr on cd4+ t cells is at a low level, which probably is correlated with nonsusceptibility to hiv1 in heps individuals by sexual transmission.
【key words】 hiv1; hiv seronegativity; tlymphocyte subsets
我國新發現hiv感染人數呈現明顯上升趨勢,近幾年艾滋病疫情每年以30%左右的幅度增長,阻止艾滋病在我國蔓延的形勢十分嚴峻。傳染病預防最有效的措施是對人群接種疫苗,但艾滋病疫苗研發雖然投入巨大,短期似乎看不到很大希望,其中一個重要原因就是對hiv對人體免疫系統相互作用的規律等問題缺乏真正意義上的了解[1]。近年來,由于艾滋病疫情控制效果遠未達到預期目標,艾滋病疫苗研究亦未取得明顯進展,一些學者開始將注意力集中到兩類特殊人群,一類人群是較高頻率暴露于hiv但未感染,hiv抗體呈陰性反應,該類人群被稱為hiv暴露后未感染者(hivexposed seronegative subjects,esns or es人群)[2]或hiv高暴露持續血清陰性者(highly exposed and persistently seronegative, heps人群)[3];另一類人群為感染hiv后長期不進展者(longterm noprogressors,ltnp)。目前,對hiv不易感性的影響因素和機理尚不明確,國內外對heps人群不易感hiv的研究并不多見。
經性接觸傳播是目前全球主要的hiv1感染傳播途徑。全球大約70%~80%感染者是通過性接觸感染上hiv1,其中異性間性接觸傳播占70%以上,而男性同性戀性接觸傳播占5%~10%。近年來,隨著我國hiv感染人群由高危人群向普通人群傳播的流行趨勢的出現,性接觸傳播hiv起了較重要的影響作用。
人免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,hiv)主要侵犯在免疫調節中起重要作用的cd4+ t淋巴細胞,引起其數量減少和功能缺陷,使機體免疫功能低下,導致各種機會感染和腫瘤的發生,最后引發獲得性免疫缺陷綜合征(aids,艾滋病)[4,5]。
cd8+ t細胞是特異性細胞免疫的效應細胞,通過分泌各種細胞因子,殺死被病毒感染的靶細胞,它是機體抗hiv最主要的免疫細胞,隨著hiv病毒量的增加,cd8+ t細胞增加,cd4+ t細胞減少,引起cd4/cd8比例倒置。
人類主要組織相容性復合物(major histocompatibility complex,mhc)分布在人體所有核細胞的表面,但由于該抗原首先在白細胞表面被發現,故被稱為人類白細胞抗原(human leucocyte antigen,hla),hladr是hlaii類分子的重要抗原之一。正常情況下,hladr僅分布于b細胞、活化的t細胞、巨噬細胞、樹突狀細胞和等[6]。hladr在免疫應答中的主要作用是與t細胞表面的cd4分子和/或抗原結合,促進抗原傳遞,hladr表達是t細胞活化的標志[7]。
人的cd38分子是分子量為45kd的單鏈跨膜糖蛋白,胞外決定簇(羧基端)為功能區,是一種多功能酶,在細胞的信號轉導中起作用,其細胞外功能區上點突變可抑制信號轉導。在成人,cd38蛋白主要表達于大多數的nk細胞、t細胞、b細胞和單核巨噬細胞。cd38分子通過對激活信號的轉導,促進t細胞激活,因而,cd38分子可作為細胞活化的標志[8]。
hiv感染者免疫系統活化使得淋巴細胞表面標志活化的抗原表達發生改變,其中hladr的上調即為淋巴細胞活化的主要標志之一[9~11]。hiv1感染導致淋巴細胞活化使外周血t淋巴細胞表面活化標志物hladr、cd38等表達發生改變。其中hladr的增高與t細胞功能缺失相關,且隨疾病進展呈線性增高[12]。cd4+ t細胞作為hiv感染的主要靶細胞,其活化性增加為hiv1的復制創造了有利的環境[9]。
本文將選擇性傳播途徑heps人群作為研究對象,選擇經性傳播途徑hiv+人群及無任何高危行為暴露的hc人群作為對照,了解經性傳播途徑heps人群淋巴細胞亞群表達及其免疫活化狀態,探討經性傳播途徑高暴露hiv不易感的免疫基礎,對識別hiv1感染的高危人群,保護易感者,以及艾滋病的預防控制、臨床治療和疫苗研究等具有重要的理論和現實意義。
1 材料和方法
1.1 研究對象 本文選擇的37例經性傳播途徑高暴露hiv1持續血清陰性者來自于hiv1陽性感染者的配偶或固定性伴,在沒有采取安全套保護措施發生性行為達半年以上,每周性行為頻率約2~3次及以上,且最后一次無保護性性接觸12周后,hiv抗體檢測持續陰性,其中男性20例,女性17例,平均年齡(33.1±7.4)歲; hiv1陽性感染者65例,系經性傳播途徑感染hiv1,其中男性35例,女性30例,平均年齡(31.6±5.6)歲;128例健康對照人群無任何hiv1高危行為暴露史,并排除hiv、hbv、hcv及梅毒感染,其中男性69例,女性59例,平均年齡(30.9±6.2)歲;該三類人群在性別和年齡構成方面差異無統計學意義,組間均衡性較好。三類人群來自于深圳市疾病預防控制中心2006年1月~2007年12月的艾滋病自愿咨詢檢測人群和常規健康體檢人群,均填寫知情同意書。
1.2 主要設備及試劑 主要實驗設備及試劑均購自becton dickinson公司,包括流式細胞儀(facscalibur);edta抗凝管;鞘液(coulter sheath liquid);cd4絕對計數管;溶血素及下列各種抗體:cd4/cd8/cd3抗體,fitc標記的抗cd4、抗cd8,pe標記的抗cd38單抗及percp標記的抗cd3、apc標記的抗hladr單抗。
1.3 方法 cd4/cd8/cd3絕對值計數,依據1997年美國疾病預防控制中心關于hiv感染者cd4+ t細胞檢測指導方法[4]:采用微量全血直接雙標記免疫熒光染色,edta(k3)抗凝管收集外周靜脈血。加相應的熒光標記抗體各20 μl于50 μl全血中,室溫避光孵育15 min。加入紅細胞裂解液450 μl,震蕩混勻后室溫避光孵育15 min直接上機觀察,應用bd公司multiset軟件檢測自動分析。
cd38+/cd4+、hladr+cd38+/cd4+細胞百分比分析:染色、溶血步驟同上,溶血孵育15 min后,800 r/min離心5 min,去上清,加入鞘液2 ml振蕩、混勻,800 r/min離心5 min后去上清。加入鞘液500 μl后上機檢測。以cd3percp、側向散射光(ssc)確定t淋巴細胞群,以cd4apc區分出cd4+ t淋巴細胞和cd8+ t淋巴細胞。再以cd38+pe、hladr+apc進行分析。應用bd公司cellquest軟件對進行檢測與分析。
1.4 統計學處理 cd3、cd4、cd8絕對數直接以均數±標準差表示;cd4/cd8比值、cd38+/cd4+、hladr+cd38+/cd4+等百分比經平方根反正弦變換后以均數±標準差表示,三組人群間均數比較采用方差分析,p<0.05為有統計學意義,所有統計處理采用spss 13.0專業統計軟件完成。
2 結果
2.1 不同人群組外周血t淋巴細胞亞群表達的比較 heps人群cd3絕對值計數與hiv+人群和hc人群差異無統計學意義,但hiv+人群cd3絕對值計數低于hc人群;heps人群和hc人群的cd4、cd4/cd8比值均高于hiv+人群,見表1。表1 不同人群組間外周血t淋巴細胞亞群的數量或比值的比較
2.2 不同人群組cd38+/cd4+、hladr+/cd4+、hladr+ cd38+/cd4+細胞百分比(%)比較 heps人群和hc人群的cd38+/cd4+百分比低于hiv+人群,但heps人群和hc人群的cd38+/cd4+百分比差異無統計學意義;heps人群的hladr+/cd4+百分比低于hiv+人群和hc人群;heps人群和hc人群的hladr+ cd38+/cd4+百分比低于hiv+人群,同時heps人群的hladr+ cd38+/cd4+百分比低于hc人群,見表2。表2 不同人群組cd38+/cd4+、hladr+/cd4+、hladr+cd38+/cd4+細胞百分比(%)
3 討論
本研究結果顯示,heps人群和hc人群的cd4+ t細胞、cd4+/cd8+比值均高于hiv+人群(p<0.001),cd8+ t細胞低于hiv+人群(p<0.001);heps人群和hc人群的cd4+ t細胞、cd8+ t細胞和cd4/cd8比值差異無統計學意義,說明heps人群與hc人群比較,在淋巴細胞亞群表達方面并無特別之處。
heps人群和hc人群的cd38+/cd4+、hladr+/cd4+、hladr+ cd38+/cd4+百分比均低于hiv+人群,機體感染hiv1后,cd4+ t細胞的活化性增加,與有關報道一致[9,10]。heps人群的hladr+/cd4+及hladr+ cd38+/cd4+百分比除了低于hiv+人群外,還低于hc人群,這也許意味著heps人群經性傳播途徑高暴露hiv1持續血清陰性,是和其hladr+/cd4+、hladr+ cd38+/cd4+的表達處于顯著性低水平狀態有著密切的聯系,進而對hiv1呈現不易感狀態。關于heps人群hladr+/cd4+、hladr+ cd38+/cd4+的表達處于顯著性低水平狀態的原因目前尚不清楚,將有待今后進一步深入研究。
綜上所述,本研究中經性傳播途徑高暴露hiv1持續血清陰性者,即heps人群對hiv1的不易感性可能與其t淋巴細胞表面標志活化抗原表達水平處于較穩定的低水平狀態有關。
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關鍵詞: 研究性學習 基礎英語課程 應用
2007年學校本科教學質量與教學改革工程提出要大力培養學生的科學創新精神,提高其創新能力和可持續發展能力。研究性學習是“學習者通過對科學研究的思維方式和研究方法的學習運用,培養研究精神和實踐能力”的學習方式。基于研究性學習的本質,研究性學習是培養學生創新能力的一種有效途徑。基礎英語課程為學生進行研究性學習活動提供了賴以“生長”、“發展”的土壤。基礎英語課程涉及社會、科學、歷史、文化、教育、生活等多方面的內容,和社會、生活息息相關,并且蘊藏著豐富的有價值的研究的問題,為學生開展研究性學習提供了極好的素材和大量的研究課題。筆者旨在探討如何將研究性學習應用到基礎英語課程中。
一、研究性學習方法的特征和意義
“研究性學習是學生在教師指導下,從學習生活和社會生活中選擇并確定研究專題,用類似科學研究的方式,主動地應用獲取知識、應用知識、解決問題的學習活動”[1]。研究性學習的實質是“學習者通過對科學研究的思維方式和研究方法的學習運用,培養研究精神和實踐能力。學習的內容包括如何收集、處理和提取信息;如何運用有關的知識來解決實際問題;如何在研究過程中與人交流和合作;如何表述或展示研究成果等等”。研究性學習是一種讓學生充分活動、充分參與的學習方式。活動能激發學生發展潛在能力,提供學生展現自己才智的機會和舞臺,刺激學生產生新的需要,提高學生的思想與才智,評價學生的發展水平與階段。研究性學習的首要特點就是自主性:自主選題、自主研究、自由創造。在研究性學習過程中,學生是主體,而教師是組織者、參與者和指導者,研究性學習培養學生的創新意識、創新精神,鍛煉解決問題和交往的能力、與他人共事的能力、管理和解決沖突的能力。
二、研究性學習在基礎英語課程中的實施
開展研究性學習的實施一般分為準備階段、實施階段和評價階段。準備階段包括:動員、選題和分組;實施階段包括:擬定方案、成員分工、信息收集、實施實驗、分析綜合討論、撰寫論文報告等;評價階段:結題、交流、展示、匯報、考核和鑒定等。
1.準備階段
主要使學生了解研究性學習的意義、特征和方式,明確基礎英語課程的授課方式為研究性學習方式,認識到研究性學習和基礎英語課程的密切聯系。在老師的幫助下,每個學生根據自己的愛好、特長和知識基礎,選擇基礎英語課程中的任意一個單元作為自己的研究性學習的載體。選擇相同課題的學生,以自愿和適量為原則結成課題組,一般以4―6個學生為一組,每組由學生推選組長負責各項工作計劃的安排和實施。
2.實施階段
以基礎英語課程的一個單元作為一個研究課題,負責該課題的小組自行決定研究的內容,研究的內容和單元內容相關是此次學習的唯一要求,在有條件完成的前提之下,研究什么、怎么研究由學生決定。教師不再是學生面前的權威,而是組織者、參與者和指導者。教師不再用命令的方式布置學習任務、填鴨的方式講授內容,教師參與到學習過程中,對課題的可行性、內容、方式提出想法,做為課題組的一員參與到學習活動中。小組成員通過調查研究,匯總觀點、信息,對收集的信息進行討論,形成研究報告。通過“自主學習―發現問題―探索討論―調查研究―探索討論―研究報告―問題反饋―反思鞏固”等環節,有助于學生培養應用知識解決問題的能力,從而增強思考力和創造力,培養創新精神和實踐能力。在學習過程中,需要小組成員的相互協作、相互幫助,學生的團隊意識也能得到培養。
3.評價階段
組成評價小組,成員由課題小組成員、其他學生、任課教師、其他教師組成。課題小組展示研究成果,成果可以是文字、實物、幻燈片、短劇等多種形式。評價注重研究過程、研究方法的評價,重在對學生創新精神和實踐動手能力的肯定,淡化研究性學習結果的評價。
三、案例分析
以基礎英語3第三單元《一周中的三個星期天威力》為例。課文由愛倫?坡的小說節選改編而成,“一周出現三個星期天”是凱特嫁給羅伯特的條件。課文講述了凱特的兩個海員朋友如何幫助羅伯特解決一周出現三個星期天的難題。這是一個有趣又令人費解的內容。課題小組成員提出了各自的疑惑、興趣、思考方向,包括一周中能否真正出現三個星期日,為什么;各地時間差異;中國每個城市的時間是否一致;夏至時間和冬至時間;我們現在的時間和美國紐約的時間;星期天的由來;我如何度過星期天;假設我是羅伯特,我怎么才能娶到凱特;課文中凱特的兩個海員朋友如何幫助羅伯特解決一周出現三個星期天的難題。從問題中看出,學生的學習過程從自學開始,產生了一系列的問題,問題超越了課文內容本身,加深了學習的內容。課題小組成員對這些題目都感興趣,決定完成這些課題。課題組成員通過網絡、圖書館,收集資料。通過小組討論的方式分享各自的成果,對研究成果進行討論、評價,形成小組共同的認識,寫出小組報告。向全班展示小組報告,全班同學對內容進行討論、評價。
四、結語
研究性學習以學生為主體,在教師的指導下,學生進行自主探索,自己發現問題、解決問題。學生學習的過程同時也是享受他人的成果、聚集資料和信息的過程,從而加深了對問題的認識,也對自己的能力有一個適度的自我評價。通過研究性學習,學生能更好地提高自主學習能力和調查研究能力,應用課本知識,提高創新能力和可持續發展能力。
參考文獻:
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