細胞生物學實驗精選(九篇)

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第1篇：細胞生物學實驗范文

關鍵詞：細胞生物學實驗課 教學改革

細胞生物學是生物技術專業的基礎課程，它主要從顯微、亞顯微和分子三個水平研究生命活動的基本規律，目前在生物學、醫學、生物制藥方面都有廣泛的應用。而細胞生物學實驗課的開設就是要讓學生將課堂上學習的理論知識與實踐操作相互結合，加強對理論知識的理解，同時提高學生分析問題、解決問題的能力和綜合素質。目前，呼職院開設的細胞生物學實驗為12課時，開設的實驗內容主要是細胞膜通透性的觀察、葉綠體的提取等，這些實驗操作簡單，學生鍛煉的機會少，間接影響了專業課程的學習。等到第四學期開設專業課程實驗時（如細胞培養實驗），會發現學生的動手能力較弱，不利于高級應用型人才培養。所以，如何通過教學改革，改變傳統的實驗教學模式，既能激發學生的學習熱情，又能達到較好的教學效果，是教育者們一直探索和思考的問題。

一、調整授課時間――使理論知識和實踐操作密切結合

目前我院細胞生物學實驗課在學期末開設，等理論課內容講完，集中時間上實驗課。這就給學生造成“理論是理論，實驗是實驗”，沒有把它們有機結合起來；另外，學期初講過的理論內容等到做實驗的時候學生已經印象模糊，在上實驗課的時候，老師還得花大量時間導入理論內容，才能開始本次實驗的操作，不利于課時的充分利用。針對這個問題，要合理調整實驗課的授課時間，讓實驗和理論“并排走”。在理論教學中，教師有針對性地在相關知識點上有意留下懸念，引導學生帶著疑問去實驗中尋找答案。這種方式，不僅解決了理論教學中存在的問題，還大大激發了學生學習的主動性和積極性，促進教學效果的提高。如講到細胞凋亡和細胞壞死時，學生很容易混淆它們的特征，通過及時做“細胞凋亡現象的觀察”這個實驗，學生學到了知識，還能主動發現問題，和老師探討或自己查閱資料嘗試解決它，完成了既定任務的同時也完成一種學習實踐活動。

二、調整教學方式――使學生由“被動”變“主動”

以往的實驗教學是以教師為中心的知識傳授型，教師會講解實驗目的、原理，學生不用動腦思考本實驗開設的依據，只是機械的接受這些內容。如此看來，實驗課和理論并無二致；而且由于時間的限制，教師都會提前做好學生在實驗操作中所用的溶液或者對樣品的長時間處理，學生只是重復實驗書上的操作步驟。這種“教師包辦”的教學方式降低了學生學習的主動性，也不利于培養學生的創新能力。基于存在的這些問題，我們逐漸改變教學方式，主要采用任務驅動教學法。在實驗課中，我們以學生為主體，教師安排組織學生有序進行實驗操作并對實驗過程中產生的問題進行引導和幫助。學生在教師的幫助下，圍繞教師安排的任務操作，在完成任務動機的驅動下， 通過對理論課所學知識的主動涉獵和認真思考，充分調動了學生學習的主動性和實驗時的責任感， 學生積極參與，完成任務后可收獲成就感。

三、調整考核方式――全面考核學生的實驗操作能力

以往細胞生物學實驗成績主要是根據學生的實驗報告進行評定，造成學生只重視實驗報告的書寫，很多學生上課敷衍了事，嚴重影響教師上課的積極性。針對這種情況，我們對考核評價方法進行了改革。實驗總成績由以前的實驗報告90%+出勤10%，改變為實驗設計占30%，實驗操作占45%，實驗報告結果占20%，出勤占5%，每次實驗都要以這種方式給成績，總成績為每次實驗成績的平均。這種成績評定方式增加了教師的工作量，但是它能準確、客觀地評價每個學生對實驗操作的學習態度、學習方法和學習效果，也制止了某些學生偷懶、渾水摸魚取得實驗成績，鼓舞了勤奮好學的學生，真正達到以評促學的效果。

四、結語

實驗課程的開設是將理論知識和實際操作有機結合的一門課程，如何上好實驗課，不但對教師有嚴格要求，對教學設備亦有要求。實驗課教師除了具備扎實的理論知識，還要具有豐富的實踐經驗。細胞生物學實驗需要較復雜的儀器設備，這就要求學校加大投入，為學生開闊視野、加強實踐操作能力提供便利條件。總之，要想讓實驗課達到理想的教學效果，還需要教師繼續努力，精心設計實驗內容、合理安排時間和公平公正的考核制度，為培養全方位、高素質、能力強的應用型人才奠定基礎。

參考文獻：

第2篇：細胞生物學實驗范文

興趣是學習最好的老師，但是現在單一的教學方式往往使學生處于被動地位。因此，改變學生的學習地位，配合多元化的教學方式來調動學生學習的積極性成為亟待解決的問題。

1.1變被動學習為主動學習

中國當前的教育模式幾乎仍是填鴨式教學，而實驗課的教授更是老師講解為主，學生完全處于被動地位。許多學生在細胞生物學實驗過程中不知前因后果，只是草率結束實驗，課后將實驗內容拋之腦后，一無所知。為調動學生的主觀能動性，在實驗開始前，只是簡單介紹相關的知識，提出實驗目標。然后由學生在課下預習實驗內容，查找資料，熟悉每一個實驗步驟的原理、所需試劑的作用及配備方法，做好充足的準備工作。在細胞生物學實驗結束后，分組討論在實驗過程中出現的問題，及對結果的多樣性進行分析，鼓勵大家暢所欲言，探討該次實驗內容能夠用于解決哪些實際的問題。最后，要求學生認真整理出一份實驗報告。在整個實驗過程中，老師只起到引導、鼓勵及評價的作用，而使學生處于主動地位。突然之間的角色轉變使很多同學學習起來有些吃力，但是堅持一學期下來，發現學生的自主學習能力明顯提高，這正是“授之以魚，不如授之以漁”。

1.2變傳統教學為多元化教學

現在一些高校的細胞生物學實驗課教學方式仍為傳統的板書講解，這種教學方式早已不符合時代的發展。為使學生更直觀生動的了解實驗過程，將實驗過程制作成錄像，上課前通過多媒體播放教學示范錄像。例如，對于原代培養細胞實驗，前期的準備工作繁瑣，耗時長，不可能每個同學都參與，這時通過播放教學示范錄像，使學生深刻了解整個實驗的來龍去脈。另外，在實驗課上由“老師講”變為“學生講”。課前要求學生預習實驗目的、原理及注意事項等，上課時隨機挑選學生為大家講解，其他同學對講解的內容進行補充和糾正。在顯微鏡的使用實驗課中，將學生分為2～3人的小組，小組中的每位同學分別操作顯微鏡，其他同學在旁觀看，指出這位同學在操作過程中存在的問題，進而加深學生對顯微鏡使用方法及注意事項的印象。

2考核方法的改革

隨著對實驗課的重視程度提高，細胞生物學實驗課成績在總成績中所占比例也相應增加。實驗課的考核不再只依靠實驗報告，而在于對學生實驗原理的掌握及實驗操作能力的評價。通過課前提問形式，了解學生的預習情況并給予一定評分。在實驗課結束時，隨機抽取部分學生，考核其對該次實驗中關鍵技術的掌握，如顯微鏡、離心機、天平等儀器的正確使用及臨時裝片的制備，并敘述在操作過程中的注意事項等，從而對學生的操作技能進行測試。另外，在批改實驗報告時，主要依據學生對實驗數據的分析及總結程度給予評分，強化學生的分析思考能力。

3結語

第3篇：細胞生物學實驗范文

關鍵詞：細胞生物學實驗；綜合性實驗；研究性實驗；開放教學

細胞生物學作為生命科學中的一門重點學科，其實驗教學在課程教學中起著舉足輕重的作用，不僅有助于學生對細胞生物學中重要知識點的學習和理解，同時對培養學生的細胞學實驗技能與創新思維起至關重要的作用。但現行的實驗教學由于諸多因素很難行之有效，主要表現在以下兩點：第一，單一的實驗教學枯燥，很難讓學生積極主動地去學習；第二，實驗內容簡單過時，基本上是驗證性實驗，缺乏綜合性、設計性。在實驗教學中開展綜合性實驗內容、實行開放式管理的創新實驗教學模式是高等教育培養創新人才、實現素質教育目標的重要途徑，也是為學科專業競賽提供人才、為教師科研提供助手的重要途徑。為了更好地發揮綜合性實驗的教學特色，教師要以培養學生的創新意識為主，鼓勵學生探索知識，提高學生的整體素質。筆者針對細胞生物學綜合性實驗的安排和實施、存在的問題和解決方案等環節進行一定的探索，以期探索一套開放式、研究型的綜合性實驗教學模式。

一、開放式、研究型的綜合性實驗教學模式

1研究型教學內容的安排

細胞生物學作為生物學的專業基礎課，實驗教學的開設與之相輔相成，是對理論教學的重要補充和鞏固。在以往的教學中，由于實驗條件等硬件設備的限制，實驗課程的開設局限于顯微觀察等較為簡單的內容。對于那些推動細胞生物學快速發展的新技術、新方法，特別是在現今實驗室廣泛采用的實驗技術等，由于實驗教學平臺的不足而導致綜合性實驗無法開設，客觀上造成了學生在實驗課堂上僅能學到較為簡單的實驗操作，而對先進技術方法的認識和理解停留在書面上，造成實驗教學與理論教學的脫節。

細胞生物學作為生物學的專業基礎課，實驗教學的開設應與理論教學相輔相成，并作為理論教學的有力補充和鞏固。我校細胞生物學的理論課往往在大二第一學期，學生剛剛接觸專業課，并且生物學相關知識和實驗技能缺乏，甚至連顯微鏡的基本操作都不熟練。因此，綜合實驗的開設應建立在基礎實驗的基礎上，而且不能脫離學生對理論知識的理解。

基于上述相關情況，筆者在細胞生物學實驗教學后期針對不同專業提供一系列相關的綜合性實驗，教師可以針對學生的不同興趣來制訂實驗方案；學生則可以自由模擬實驗的內容和方案；實驗中的缺點和漏洞必須由教師指點后，方可開展。綜合性實驗開設在課程后期，具體完成由學生自由支配時間，在學院實驗室內完成實驗。比如，基于水稻原生質體轉化的亞細胞實驗。原生質體轉化實驗在各實驗室里廣泛應用，已成為一種非常重要的細胞生物學類實驗技術，但由于該實驗操作時間長而且實驗教學不具備熒光共聚焦顯微鏡平臺等局限，導致此類實驗很難在實驗課上開設。但是，這些條件可以在科研實驗室內得到滿足，因此，綜合性實驗的開設首先從地點上由傳統的實驗教學平臺轉移到科研實驗室。水稻原生質體轉化實驗是依賴纖維素酶進行酶解水稻幼苗分離原生質體，后續利用PEG將外源片段轉入原生質體15～20小時，觀察熒光蛋白在原生質體中的表達情況。該實驗的重點是如何增加外源片段的轉化效率，其影響因素很多，包括培養的幼苗生長狀態、選取的幼苗部位、w維素酶酶解時間、PEG濃度以及轉化時間等。這些影響因子能夠給予學生更多的思考空間，使原本枯燥、簡單、機械的實驗操作變得更具有研究性，能夠很好地激發學生的創造性思維，利于培養學生分析問題、解決問題的能力。另外，外源片段的選取來自于已經報道的融合熒光蛋白的各類細胞器標志性蛋白，如內質網、細胞核和質膜等，最終通過熒光蛋白的觀察可以更形象地幫助學生認識植物細胞中各種細胞器的形態。本實驗跟理論課中介紹的細胞培養、細胞轉化、熒光蛋白標記和細胞器結構等知識點有機地聯系在一起，更深刻地加深學生對理論知識的理解。

2教學內容的實施

（1）課前準備。綜合性實驗的開設應基于過硬的基本技能和扎實的理論知識，不能忽視學生的接受能力，一味地追求創新性、研究性試驗的開設而放棄基本技能的培養，因此，綜合性試驗開設應基于一些基本實驗，如顯微操作和細胞培養等。同時，實驗課內容的選取也應與理論課的開設保持一致，這樣既能避免知識的重復講述浪費時間，也有利于學生對實驗內容的更好理解，增強實驗課的實驗質量和課堂效果。同時，針對學生對綜合性實驗相關理論與技術上的欠缺，一方面，教師可以加強學生的課前預習，針對實驗內容督促學生加強文獻閱讀，根據自身情況制訂具體的實驗方案，并提前準備實驗材料和試劑；另一方面，教師可以充分利用多媒體教學手段，制作規范的操作視頻，并在課前展示給學生，直觀生動地闡述實驗難點。這樣既有助于提高學生的實驗積極性，還能增大課堂教學的信息量，提高課堂效率，為開放式實驗模式的順利采用打下基礎。

（2）實驗分組。為了既能培養學生的獨立思維能力，又使其具有相互協作的團隊精神，要求每4～5個學生為一組。教師按照學生擬定的實驗計劃充分提供實驗試劑和操作平臺，最大限度地給學生創造實驗操作機會，爭取每一個實驗環節都由學生親自動手，包括課前實驗試劑的配制和實驗材料的準備，充分鍛煉學生的動手能力。

（3）實驗操作。綜合性實驗在科研實驗室中的開設是開放式的。實驗開始時，學生自己動手，依靠教師的機會減少；教師也不能像平時上課一樣隨時指點學生，因此學生自己動手創新的時間增多，以此來看，實驗式教學的效果有效。學生的實驗操作規范是否正確，直接影響實驗教學質量和教學效果。針對上述問題，除了課前多媒體教學視頻的示范，實驗室中的研究生會為學生及時提供技術支持和實驗安全監督，保證實驗的順利進行。

3課后反饋

實驗結束后，實驗結果的總結和實驗方法的優化是綜合性實驗開設的重要環節，是研究性實驗的重要體現。由于各種因素的影響，各組實驗效果不盡一致，甚至會因某些實驗環節考慮不周、操作不當而導致實驗失敗，比如，在溶液配置過程中，僅僅考慮了融合劑的濃度而容易忽視溶液PH值的調節，影響質粒的轉化效率而導致實驗效果均不理想；還有沒有考慮水稻幼苗的生長狀態，導致分離的水稻原生質體狀態不佳影響實驗效果，等等。而通過實驗課后的分析和總結對實驗設計的優化，不僅使學生了解到科研實驗的基本流程，同時也培養了學生嚴謹的實驗態度和思考分析問題的能力。學生對這種能使自己主動實驗的課程持歡迎態度，實驗效果得到極大的提高。

二、結論

筆者利用正常教學周的周末在個別班級探索性地進行開放性、研究型的綜合實驗教學模式的摸索，在內容上體現從單一實驗到研究性實驗的漸進，從教學方式上體現從常規教學到半開放教學的轉變，以期在教學目標上達到訓練基本技能與基本理論到綜合實驗能力、創新實驗能力與素質的提高，取得了一致好評。多名學生因為綜合性實驗的吸引對生物學實驗產生濃厚的實驗興趣，他們在上好課的前提下利用課余時間主動加入本課題組中參與更深入的科學研究，并獲得了國家、省和校級創新課題的資助，且所參與的課題部分取得了不錯的進展。最令人欣慰的是，學生并沒有因為花費大量時間在實驗室而影響課程的學習，他們每年幾乎都能獲得國家等各級獎學金，多人被保送到著名大學和科研院所，并獲得導師的好評。

開放性、研究型細胞生物學實驗教學體系相對于傳統實驗教學模式，在教學模式和教學理念方面都有所改進，但隨著細胞生物學學科的發展及實驗條件的改善，筆者認為還可以從以下幾個方面進一步完善這一教學體系：第一，緊跟細胞生物學學科前沿，密切聯系科研技術，逐步更新完善實驗內容。例如：細胞轉化實驗可以同時提供煙草表皮細胞農桿菌注射、洋蔥表皮細胞基因槍法以及水稻原生質體法等試驗方法供學生選擇，比較各種方法的實驗效果并進行相關改進等。第二，合理加大設計實驗在日常教學中的比例。遵循“通”與“專”結合，充分尊重個人專業興趣，盡可能為感興趣的學生提供進一步訓練的實驗條件，充分調動學生的主觀能動性和實驗積極性，挖掘學生潛能及創造力。

參考文獻：

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[9]薛雅蓉，莊重，康鐵寶構建三級細胞生物學實驗教學體系的實踐[J]高等理科教育，2013，2（108）：92-94

第4篇：細胞生物學實驗范文

關鍵詞：細胞生物學;醫學遺傳學;實驗教學;教學質量

中圖分類號：G40-034 文獻標志碼：A 文章編號：1008-3561（2015）03-0085-01

細胞生物學和醫學遺傳學是醫學院校的基礎課程，也是一門實驗性很強的學科。細胞生物學和醫學遺傳學的教學分為理論教學和實驗教學兩部分。實驗教學與理論教學聯系密切，相輔相成，不可或缺。細胞生物學和醫學遺傳學實驗教學要重視對學生獨立觀察、思考和操作能力的培養，學習能力和創新能力的培養，以及分析問題、總結問題能力的培養。綜合多年來對臨床醫學、口腔醫學等專業學生的實驗教學實踐和探索，筆者就實驗教學提出幾點體會，以期培養出高素質專業型醫學人才。

一、提高教師自身素質

首先，教師應通過網絡高校教師在線培訓和查閱最新文獻，不斷學習新的理論和技術，應用到日常實驗教學中，讓學生了解一些科學前沿的知識，充實教學內容。其次，基礎學科教師還要兼具臨床醫學方面的知識，為學生日后走向臨床打下堅實的基礎。另外，高素質的師資隊伍是保證實驗教學水平不斷提高的關鍵。近年來，我科室教師不斷提升自己的學歷，通過在職進修、脫產學習等方式提升師資隊伍的學歷水平。

二、改變教學模式，提高學習興趣

在以往的教學中，學生的一切實驗行為都由教師安排，教師是主體，學生只是被動地接受，忽視了學生的自主意識。標本片都是教師給準備好的，直接在顯微鏡觀察即可。整個教學過程學生缺乏主動性，教學效果欠佳。如學生進入教室，首先就把教師提前在黑板上寫好的目的、原理和實驗步驟抄寫下來，顯微鏡下觀察標本片也是敷衍看看，結果有的就按照書上畫，或者互相抄襲，如同完成任務一樣完成實驗報告。事實上，在細胞生物學和醫學遺傳學實驗課中，學生也應該是實驗的參與者，而不是任務的執行者。因此，適當地安排一些由學生自己動手制作完成的實驗用品對于提高學生的學習興趣能起到很好的作用。如以前我們實驗課學習顯微鏡的使用，我們讓學生學會顯微鏡如何操作后，給學生一些已經制作好的各種組織的標本片進行觀察。而現在，我們讓學生自己動手制作標本片，取材更是取自學生自己的口腔上皮細胞，這樣，學生的制作熱情和觀察熱情就被激發了出來。每個學生都積極地制作一張自己的口腔上皮細胞標本片，放在顯微鏡下仔細觀察，認真繪圖。有的學生還用手機拍下來，看著自己親手制作的標本片，很有成就感和參與感，教學效果顯著提高。

三、采用多種教學手段輔助教學

有些實驗理論較為抽象，學生理解起來有一定的難度。尤其是對于文科學生，細胞生物學和醫學遺傳學的知識以前幾乎沒有學習過，基礎薄弱。怎么能讓這些學生快速入門呢？我們除了常規的板書以外，應利用現代科技手段、多媒體動畫輔助教學，真正做到抽象的理論直觀化，讓學生對于整個實驗原理是如何發生發展的一目了然。舉例來說，在細胞有絲分裂觀察實驗中，細胞有絲分裂的過程既是重點又是難點，復雜且抽象。但是借助于三維立體動畫展示，可把整個有絲分裂過程，即兩組完全一樣的染色體如何精確分離的過程清晰明了的呈現在學生眼前。通過這樣的展示，學生輕松地掌握了實驗理論，為接下來的細胞形態觀察和畫圖打下了良好的理論基礎。

四、改進教學方法，理論與實際相結合

教師在教學過程中常規使用的教學方法是講授法，這樣學生理解起來比較被動，只能跟著教師的思路走，忽視了學生對知識獲得的自主性和能動性。現在，我們除了講授法外還加入啟發式教學，并注重理論與實際結合起來，調動了學生思維的主動性，為學生的持續發展創造了更廣闊的空間。例如人類染色體觀察與核型分析實驗中，在講授正常染色體形態、數目前，先提問學生是否見過先天愚型的人。學生在教師的啟發下開始積極思考，回答出自己見過哪些人，有什么樣的特征，如表情呆滯、發育遲緩、身材矮小等。教師接著提問這些人為什么有這樣的缺陷，學生一般答不上來。教師就可以解釋因為他們多了一條23號染色體，就造成了人生這么大的缺憾，所以今天我們要先把正常染色體的形態數目了解清楚，才能對一些遺傳學疾病采取積極地預防措施。通過這樣的講解，學生明白了學習和研究染色體的重大意義，學習態度也認真了許多。同時，還激發了學生投身科研、造福人類的熱情。

五、教學相長，亦師亦友

傳統教學中，學生對老師是比較敬畏的，課堂氣氛也比較嚴肅，教師在前面講，學生在下面做筆記。實際上，我們應該改變這種刻板的場景，與學生多一些交流與溝通。如可讓學生暢談自己對于某些理論、某些現象的看法，教師給予糾正和補充，從而加深學生對知識的理解與記憶。尤其是實驗課，學生有任何問題隨時都可以提出來讓老師幫助解決，或者學生有更好的建議可以應用于實驗教學，這樣才能做到教學相長。

通過以上幾點，充分調動了學生的學習積極性，活躍了課堂氣氛，豐富了教學內容，培養了學生嚴謹的實驗態度和科研意識，細胞生物學和醫學遺傳學實驗教學取得了較好的教學效果。

參考文獻：

第5篇：細胞生物學實驗范文

[關鍵詞]腭裂；瘢痕；成纖維細胞；rhIFNα-2b；rhIFN-γ

[中圖分類號]R619+.6R782.2 [文獻標識碼]A [文章編號]1008-6455（2011）06-0926-03

Empirical study of interferon affecting on the fibroblasts of the exposed bone surface from cleft palate scar

TAO Ming1,2,HU Chao3,DING Ding1,ZHAO Li-li1,ZHAN Jia1,SUN Hui1,SUN Hui1,WANG Yuan-yin1,ZHOU Jian1

(1.Stomatological Hospital,Anhui Medical University,Hefei 230032,Anhui,China;2.Department of Stomatology,Yijishan Hospital of Wannan Medical College,Wuhu 24100,Anhui,China;3.Department of Stomatology,The Third Military Medical University,Chongqing 400037)

Abstract:ObjectiveTo study the effects of interferon to the biological activities of fibroblasts origined from the exposed bone surface from cleft palate scar in vitro cultural. MethodsMaking rabbit cleft palate scar models, in vitro culture,observed by MTT assay and flow cytometry, analysis the effects of interferon to the biological activities of fibroblasts origined from the exposed bone surface of cleft palate scar. Data using analysis of variance and q test treatment. ResultsCompared with the control group,after added interferon, cleft palate fibroblast's growth trends and value-added activity of experimental group was inhibited significantly. Percentage of cells decreased during the S-G2-M stage.ConclusionsInterferon on the growth trends and value-added activity of the cleft palate fibroblast has significant inhibitory effect, indicating that cleft palate in the prevention of scar formation of the exposed bone surface has some value.

Key words:cleft palate；scar；fibroblast；rhIFNα-2b;rhIFN-r

先天性腭裂發病率約占人口出生率的1/700左右，嚴重影響患者的口腔頜面部器官的形態與功能及心理健康。雖然目前的外科技術已能實現對腭部裂隙的良好修復，有助于語音及吞咽功能的恢復，但大量的臨床與基礎研究證實，術后患者上頜骨的生長發育繼發畸形會變得更為嚴重，對患者的頜面形態與功能構成嚴重危害。腭裂術后上頜骨繼發生長畸形的病理解剖學基礎已經探明是腭裂術后遺留在上頜骨硬腭的骨面瘢痕攣縮所致[1-2]。因此，如何防治腭裂術后骨面瘢痕形成是目前口腔頜面外科領域亟待解決的難題之一。在瘢痕的形成與增生過程中，成纖維細胞是主要的效應細胞，其功能狀態是影響瘢痕發生、發展、以及轉歸的主要因素。干擾素（IFN）具有抗病毒、抗腫瘤、影響細胞增殖分化等多種生物學效應。臨床上已經有將干擾素用于防治瘢痕形成的報道,但用干擾素觀察腭裂術后骨面瘢痕成纖維細胞生物學行為的影響尚未見報道，本實驗通過體外觀察和研究干擾素對腭裂術后骨面瘢痕成纖維細胞的生物學作用，可為尋求應用干擾素治療腭裂術后骨面瘢痕提供實驗依據。

1材料和方法

1.1 實驗試劑：DMEM培養基（低糖 美國Sigma公司），新生小牛血清（杭州四季青生物工程材料有限公司），胰蛋白酶（美國Sigma公司），PBS(pH7.2～7.4)液，Hank's(pH7.2～7.4)液（自配），rhIFNα-2b和rhIFN-γ（安徽安科生物工程股份有限公司），MTT溶液（5mg/ml）(美國Amresco公司)，二甲亞砜（DMSO，分析純）。

1.2 實驗方法

1.2.1兔腭裂術后骨面瘢痕動物模型的制備：成年大耳白兔6只（合肥工業大學控釋藥物研究中心動物室提供），體重2千克，3%戊巴比妥鈉溶液按30mg/kg進行耳緣靜脈注射麻醉，仰臥位固定四肢，張口，沿腭中縫做縱行切口，逐層切開腭部軟組織，骨膜分離器左右分離軟組織，顯露出上腭骨面，徹底止血后沿切口縫合。麻醉效應過后，兔肢體可自由活動，術后連續5天每日肌注80萬單位青霉素，術后4周在全麻下沿原切口切開，取腭部骨面上的瘢痕組織以進行下一步實驗。

1.2.2腭裂術后骨面瘢痕成纖維細胞的原代培養及傳代：采用組織塊法進行成纖維細胞原代培養(見照片2)，用含15%新生小牛血清DMEM培養液于37℃、5%CO2孵箱中培養，2～4天更換培養液，待原代培養長出的成纖維細胞接近或達到融合時，用0.25%胰酶消化傳代。

1.2.3細胞生長增殖情況（MTT測定法）：取第3～5代生長狀態良好的對數生長期細胞，消化后用15%新生小牛血清DMEM培養液制成細胞懸液，調整細胞數位1×106/ml，接種于96孔培養板中，共2板，每孔加入200μl，并留下不含細胞和培養液的調零孔，將96孔板移入37℃、5%CO2孵箱中培養24h。取出96孔板，棄上清液，每孔加入200μl無血清DMEM培養液繼續培養24h。取出96孔板，換新培養液，實驗1組分別加入濃度為2 000、4 000、6 000、8 000、10 000U/ml的rhIFNα-2bDMEM培養液，實驗2組分別加入濃度為2 000、4 000、6 000、8 000、10 000U/ml的rhIFN-γDMEM培養液每孔液體總量為200μl；對照組加相同容積的DMEM培養液；每一濃度藥物設6個平行孔。將96孔板置入37℃、5%CO2孵箱中分別培養24、48h。

MTT測定法：取出96孔板，每孔加入MTT溶液（5mg/ml）20μl，繼續培養4h后取出，小心吸去孔內上清液，每孔加入150μlDMSO,振蕩10min，使結晶物充分溶解；選擇570nm波長，在酶聯免疫檢測儀上測定各孔光吸收（OD）值。

1.2.4細胞周期分析(流式細胞術)：取第6～8代生長狀態良好的對數生長期細胞，消化后制成單細胞懸液，調整細胞數為1×106/ml，接種于25cm2的細胞培養瓶內，培養24h。棄原培養液，加入無血清DMEM培養液繼續培養24h，進行細胞同步化處理。實驗1組分別加入終濃度為2 000、4 000、6 000、8 000、10 000U/ml的rhIFNα-2bDMEM培養液；實驗2組分別加入終濃度為2 000、4 000、6 000、8 000、10 000U/ml的rhIFN-γDMEM培養液；對照組加入相同容積的DMEM培養液，每組3瓶。將培養液置入37℃、5%CO2孵箱中培養48h；0.25%胰酶消化后制成單細胞懸液，1 000r/min離心5min，棄上清，收集細胞，70%冰乙醇固定18h，4℃保存；PI綜合染液室溫下避光染色30min，300目尼龍網膜過濾，流式細胞儀測細胞周期。

1.3統計學處理：實驗結果用x±s表示，采用方差分析及q檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1 干擾素抑制腭裂術后瘢痕成纖維細胞生長增殖：MTT比色實驗測定結果顯示，加入rhIFNα-2b和rhIFN-γ培養24h后實驗組于對照組OD值之間差異無統計學意義（P＞0.05），培養48h后，與對照組比較，2 000U/ml濃度組差異無統計學意義（P＞0.05），4 000、6 000、8 000、10 000U/ml濃度組差異有統計學意義（P＜0.05，P＜0.01），提示rhIFNα-2b和rhIFN-γ對腭裂術后骨面成纖維細胞的增殖有抑制作用（見表1、表2）。

2.2干擾素對腭裂術后瘢痕成纖維細胞的細胞周期的影響：流式細胞術測定結果顯示：對照組成纖維細胞培養48h處于S-G2-M期的百分比為（44.54±3.21）%，加入rhIFNα-2b和rhIFN-γ作用48h，與對照組比較，2 000U/ml濃度組差異無統計學意義（P＞0.05）；而4 000、6 000、8 000、10 000U/ml濃度組處于S-G2-M期的百分比均明顯低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05，P＜0.01）（見表3）。

3討論

國內外研究已表明，腭裂術后硬腭部骨面的形成及瘢痕修復將抑制患者上頜骨的生長，引起患者顏面部凹陷，反牙合等畸形和功能障礙。有研究表明骨面的瘢痕組織，由于缺少大血管和彈力纖維，膠原纖維呈橫向走行并通過纖維附著于硬腭骨上，而且粘骨膜與牙周韌帶相延續，因此在收縮時，對牙弓產生向內的牽張力，從而導致了面中份骨的發育不足[3]。創傷愈合是人體組織修復的一種過程，而瘢痕形成則是過度愈合或愈合紊亂。瘢痕中的成纖維細胞是創面愈合、瘢痕形成、增生和攣縮的功能性細胞，其增殖、活化、分化的異常直接導致病理性瘢痕的形成。干擾素是一類具有抗病毒、抗腫瘤以及免疫調節等多種生物活性的細胞因子。它是目前比較明確的瘢痕增生負性調節因子[4-5]。近年來,許多體外研究表明干擾素具有抑制成膠原的合成，促進膠原降解以及激活膠原酶的活性,起到對病理性瘢痕中成纖維細胞的抑制作用[5-6]。臨床上也有局部注射干擾素來治療病理性瘢痕的報道[7-8]。然而，干擾素是否對腭裂術后骨面瘢痕來源的成纖維細胞有抑制作用，之前未見報道。本實驗將干擾素作用于體外培養的兔腭裂術后骨面瘢痕成纖維細胞中，結果表明對細胞增殖產生明顯的抑制作用。

我們為了能夠將干擾素應用到預防腭裂術后的繼發畸形中，于是在此首先觀察了rhIFNα-2b和rhIFN-γ對體外培養的腭裂術后骨面瘢痕來源的成纖維細胞的作用，以便為后續研究打下基礎。本實驗顯示，IFN在較高濃度時對瘢痕成纖維細胞的生長增殖具有明顯的抑制作用。本實驗中采用MTT法檢測IFN對成纖維細胞生長增殖的影響，結果發現當加入IFN48h后，4 000～10 000U/ml濃度組OD值明顯低于對照組（P＜0.05，P＜0.01），說明實驗組的細胞比對照組細胞生長要慢，活細胞數相對較少，提示IFN對細胞增殖活性產生了抑制作用。但實驗組細胞48h的OD值與24h相比仍然有所增加，說明rhIFNα-2b不能絕對抑制細胞增殖，而是抑制了細胞的增長趨勢。由于MTT比色法測定反映的是細胞總數，于是我們又應用流式細胞儀測定了細胞總數中各細胞周期的百分比，反映細胞中處于分裂期的總體比例，能準確地揭示群體細胞中具有分裂能力的細胞量。結果顯示加入IFN后在短時間內（24 h）與對照組無明顯差別，而延長觀察時間（48h） 則整體瘢痕成纖維細胞中處于S-G2-M期的比例降低（2 000 U/ml濃度組除外）。說明加入的IFN的抑制活性與細胞數量改變之間有一定的時間濃度依賴關系。我們預測：高濃度的IFN在促使瘢痕組織軟化、預防和治療瘢痕攣縮方面可以發揮作用。

本研究分析測定了IFN對瘢痕成纖維細胞的生物學效應。體外實驗肯定了IFN對腭裂術后骨面瘢痕的成纖維細胞的生長趨勢及增殖具有顯著的抑制作用。雖然其具體的作用機制目前尚未完全清楚，但為進一步進行活體實驗提供了依據，也為臨床上預防和治療腭裂術后骨面瘢痕形成及術后上頜骨繼發畸形提供了重要的參考信息。

[參考文獻]

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第6篇：細胞生物學實驗范文

關鍵詞 細胞生物學 自主學習 合作研究 教學模式

中圖分類號：G424 文獻標識碼：A DOI：10.16400/ki.kjdkx.2015.10.049

Research and Practice of Autonomous Learning and Cooperative

Research Model in "Cell Biology" Teaching

HOU Lixia， ZHANG Yuxi， YANG Hongbing， LIU Xin

（College of Life Sciences， Qingdao Agricultural University， Qingdao， Shandong 266109）

Abstract Cell biology is one of the four basic disciplines in the life sciences， but also a frontier-based experiments. "Autonomous learning， cooperative research" mode is especially important for students in the habit of lifelong learning， this paper discusses the teaching mode in cell biology course in practice.

Key words cell biology; autonomous learning; cooperative research; teaching mode

細胞生物學是生命科學領域的四大基礎學科之一，在生命科學中占有舉足輕重的位置，細胞生物學課程是生物科學和生物技術專業的必修課。其教學質量的好壞直接影響到生命科學學院學生的基本素質和質量。“自主學習、合作探究”的學習模式是“終身學習”的基礎，可以使學生終身受益，正所謂“授之以魚”不如“授之以漁”，也是培養應用型人才、創新型人才的手段之一。結合筆者的教學經驗，對該模式進行了探索與實踐。

1 “自主學習、合作研究”教學模式的涵義

自主學習、合作探究的教學模式重視學生學習和探索的過程，注意學生在學習中的體驗。自主學習的特點主要表現在：自主性、獨立性、自控性、過程性。①自主性是指學生處于主體地位，積極參與較教學過程，也就是有學習的內在需要;獨立性是指學生能夠總結出適合自己的學習方法，從而獨立解決學習中遇到的問題;自控性是指學生對學習的過程能夠按照自己遇到的問題總結經驗并且進行修正;過程性是經過學生分析、比較、判斷等過程進行總結，并最終得出結論，強調的是在過程中學習。

合作探究的特點主要表現在互動性，交往性，問題性和開放性。②互動性是指老師與學生的互動以及學生之間的互動，尤其是后者容易被忽略。合作學習的倡導者們認為：在課堂上，學生之間的互動關系對于其學習成績、社會化和發展的影響力至關重要;交往性主要是指在學習過程中，除了對知識的掌握和理解，也是一種人與人之間的交往過程;問題性是指整個學習的過程就是發現問題、提出問題、分析問題和解決問題的過程。開放性是指給學生一個自由發展的空間，有利于學生思維的活躍。

2 “自主學習、合作研究”教學模式的必要性

傳統的教學中，教師往往著重知識傳授而輕視了思維的訓練，著重知識的單點深入而輕視了縱橫聯系;著重理論知識的記憶而輕視實踐操作。這種模式不利于學生思維的發展，而且抑制了學生的個性。③為了學生充分理解和掌握細胞生物學的基本內容和研究方法，同時，在遇到最新的研究課題時能夠獨立思考，找到解決問題的思路和方法，“自主學習、合作探究”的教學模式是很有必要的。此外，“終身學習”一直以來都是教育工作者們所倡導的一種學習方式，可以使學生終身受益，正所謂“授之以魚”不如“授之以漁”，學生在“自主學習、合作探究”的氛圍中愿學、樂學、會學、善學，養成終身學習的習慣，④鍛煉學生的思維能力，提高學生解決問題的能力和創新能力。

3 “自主學習、合作研究”教學模式的實施

3.1 激發學習動機，使學生的學習具有持久的動力

3.1.1 講好第一節緒論課，激發學生的好奇心

緒論課是一門課程的開始，這節課的效果直接影響學生對細胞生物學的學習興趣，甚至影響學生對這門課的學習效果。在緒論中要強調細胞生物學領域的一些新發現、新技術、新興的研究領域、著名科學家的事跡等來激發學生潛在的主動學習興趣。此外還要注意理論聯系實際，介紹日程生活中應用到的細胞生物學的知識和技術，激發學生的好奇心。

3.1.2 成立興趣小組，關注細胞生物學領域的某方面的研究進展

老師設計題目，如：細胞信號轉導與癌癥的關系;植物細胞凋亡研究進展;細胞器與遺傳病等內容，或者選擇自己感興趣的領域，讓學生們自己結成5人左右的小組，負責關注本領域的新聞，新的科學發現，新的成果應用等信息，并階段性總結匯報。

3.2 以思維訓練為中心，使學生學會思考問題

第7篇：細胞生物學實驗范文

關鍵詞：植物細胞；分裂方向；學生演示

中圖分類號：G642.0 文獻標志碼：A 文章編號：1674-9324（2014）29-0079-02

《植物學》是高等農林院校植物生產類和生物類各專業本科生必修的專業基礎課[1]，是一門研究植物形態解剖、生長發育、生理生態、系統進化、分類以及與人類關系的綜合性科學，是生物學的分支學科。通常的講課方式都是以教師的講解為主，無論利用什么教具，如實物、掛圖，甚至運用多媒體教學，但作為學生往往是被動接受，如果讓學生參與到課程中來，效果會更佳。細胞是構成生物體的結構和功能的基本單位，細胞分裂是一個母細胞分裂成兩個子細胞的過程。細胞分裂有其重要意義，比如保證了遺傳物質的連續性與穩定性；是細胞增多的一種方式等。尤其是相對于被子植物中的雙子葉植物來講，植物體的長高和增粗的過程就是由植物體內的次生分生組織細胞進行細胞的分裂、分化而來的。而作為植物體內的細胞來講，它的分裂是有方向性的。對于細胞分裂方向的內容，比較抽象，首先是因為細胞本身就很小，肉眼不可見；同時細胞分裂是一個動態的過程，而這個過程和結果在一般條件下也很難觀測的到。在作者授課的過程中，每每講到這里，絕大多數學生都反應，這部分內容太抽象，難以理解。經過多年的摸索和積累，我們摸索出來了一個小方法，就是在講解過程中，讓學生參與演示，讓他們親自感受細胞的分裂和分裂方向，這樣既提高了趣味性，還使學生記憶深刻，收到了很好的效果。

一、關于細胞分裂方向的幾個概念

分生組織的細胞具有各種不同方向的分裂，其可能向一切方向發生分裂，但通常有三個主要的分裂方向，這三個主要的分裂方向在植物學上叫做切向分裂、徑向分裂和橫向分裂。就細胞壁面方向而言，假定細胞是方形立體的，它的壁面方向按在器官中的位置可分為內外切向壁、左右徑向壁、上下橫向壁等六個對稱面[2]。

1.切向分裂和切向壁。切向分裂是細胞分裂與器官的圓周最近處切線平行，細胞分裂后所生成的新細胞壁在橫切面上和植物體或植物器官的半徑線垂直。新壁為切向壁。理解上可認為兩個子細胞是內外排列或沿半徑方向排列。切向分裂的結果，增加細胞的內外層次，使器官加厚，故切向分裂又叫平周分裂。

2.徑向分裂和徑向壁。徑向分裂是細胞分裂與器官的圓周最近處切線垂直，細胞分裂后所生成的新細胞壁在橫切面上和植物體或植物器官的半徑線平行。新壁為徑向壁。理解上可認為兩個子細胞時左右排列或沿切線方向排列。徑向分裂的結果，擴展細胞組成的圓周。

3.橫分裂和橫向壁。橫分裂是細胞分裂與器官的橫切面相平行，細胞分裂后所生成的新細胞壁橫切植物體或植物器官縱軸。新壁為橫向壁。理解上可認為兩個子細胞是上下排列或縱向排列。橫分裂的結果，增加了植物體或植物器官的長度。徑向分裂和橫分裂又稱垂周分裂，因為細胞經徑向分裂或橫分裂后所生成的新細胞壁與植物體或植物器官的外表面是垂直的。

二、學生參與演示的過程

在邀請學生演示的過程中，要注意講解的科學性，要用書面用語，而且要與概念相結合；除此之外，還要注意其趣味性，增加學生的興趣從而加強其理解與記憶。首先，邀請幾名學生圍成一個圓（他們之間不要有太大的空隙），代表植物器官橫切面，而每個學生代表圓周上的“細胞”。最好學生面向外，他們的前胸、后背代表內外切向壁，臂膀代表左右徑向壁，頭頂、腳底代表上下橫向壁。然后，再找同樣數量的學生站在他們各自的前面，每兩名學生內外站立，代表原來圓周上的細胞分裂后產生的細胞，其分裂是內外分裂，代表切向分裂結果，而二人之間的相鄰部分即外側學生的后背和內側學生的前胸部分為新生成的切向壁，此為切向分裂（注意講解概念）。而站在的學生（代表細胞）所在的圓周增長，而“細胞”數量未發生變化，所以站在外側學生之間會出現較大的空隙，這就需要進行左右排列的細胞分裂，即需要細胞進行徑向分裂來擴展圓周。橫向分裂即每個細胞向頭頂和腳底的方向（即向上和向下）進行分裂，比較容易理解。讓學生參與演示細胞分裂的過程，形象生動，能取得很好的結果。

三、教學效果自我總結與思考

經過學生參與細胞分裂過程的演示，學生對本部分內容知識掌握有了明顯提高，同學對此也表現出了濃厚的興趣。傳統教學模式是教師在課上講課，布置作業，學生課下進行復習，其實，學習的真正主體是學生，讓學生參與到教學中來，甚至使學生同時成為教學過程的實施者和接受者，其效果不亞于原本教師課堂內講授知識的效果。

參考文獻：

第8篇：細胞生物學實驗范文

【摘要】

目的探討四物湯對環磷酰胺所致貧血小鼠血清促紅細胞生成素（EPO）及腎EPO mRNA表達的影響。方法用環磷酰胺腹腔注射建立小鼠貧血模型，同時給小鼠灌服四物湯，ELISA方法檢測小鼠血清EPO的含量；Trizol試劑提取腎組織總RNA，反轉錄-聚合酶鏈反應（RT-PCR）方法檢測腎組織EPO mRNA表達情況（β-actin為內對照標準）。結果四物湯能顯著升高小鼠血清EPO水平，明顯促進腎組織EPO mRNA的表達。結論四物湯能抑制環磷酰胺所致的小鼠貧血，其作用機制可能是通過促進腎組織EPO mRNA的表達，使腎臟合成EPO增多，從而促進紅系細胞生長。

【關鍵詞】 四物湯；促紅細胞生成素；基因表達

Abstract：ObjectiveTo investigate the effect of Siwu Tang on erythropoietin(EPO) and EPO mRNA expression of Anemia induced by cyclophamide in mice.MethodsAnemia was induced by cyclophamide in mice，and Siwu Tang were administered.Serum EPO level was measured by ELISA.Total RNA was isolated by Trizol reagent.The mRNA expression of EPO in mouse kidney was measured by RT-PCR(β-actin gene as a control).ResultsSiwu Tang could significantly increase serum EPO level and promote the mRNA expression of EPO in kidney.ConclusionSiwu Tang has inhibitory effects on Cyclophamide-induced anemia in mice and the mechanism may be related to increasing EPO production by promoting the mRNA expression of EPO in kidney，and stimulating the growth of erythroid cells.

Key words：Siwu Tang； Erythropoietin； Gene expression

四物湯是祖國醫學補血調血的經典方劑，其功用是補血調經，主治血虛兼血滯，療效顯著，但其作用機理尚未完全闡明清楚。本研究用環磷酰胺（cyclophamide ，CY）腹腔注射建立小鼠貧血模型，擬考察四物湯對小鼠血清促紅細胞生成素（erythropoietin，EPO）及腎臟EPO mRNA表達的影響，從分子水平探討四物湯補血作用的機理。

1 材料與儀器

1.1 動物昆明種小鼠，6～8周齡，體重20～25 g，雌雄不限，由贛南醫學院實驗動物中心提供。

1.2 四物湯的組成及煎制四物湯由熟地、當歸、白芍、川芎組成，購于本院附屬醫院中藥房。按《太平惠民和劑局方》規定的劑量稱取，熟地15 g，當歸10 g，白芍10 g，川芎6 g，共計41 g/d。按《中藥藥理研究方法學》［1］計算小鼠的等效劑量為10 g/(kg·d)。傳統方法煎制兩次，合并后過濾、濃縮，配制成1∶1的藥液（即每毫升藥液含生藥1 g），置4℃保存備用。

1.3 儀器及試劑TGL-16G型高速冷凍離心機（上海安亭科學儀器廠）；全自動PCR擴增儀（2700型，美國Applied Biosystems公司）；電泳儀（北京六一儀器廠）；紫外分光光度計（2100型，美國Amersham Biosciences公司）；凝膠數字成像系統（法國EEB公司）；環磷酰胺（江蘇恒瑞醫藥公司，批號03041521），Trizol試劑、Oligo(dT)16、Taq DNA聚合酶和dNTP（上海生工）、M-MuLV 反轉錄酶和50bp DNA Marker（MBI）、EPO檢測試劑盒（德國BM公司），其余試劑均為國產分析純。

2 方法

2.1 動物模型的建立小鼠常規飼養數天適應環境后，按小鼠體重100 mg/kg于給藥第1天用CY腹腔注射1次，造成貧血模型［1］。

2.2 動物分組及給藥方法30只昆明種小鼠隨機分成3組，每組10只，分別為正常對照組（對照組）、CY組、CY+藥物組（藥物組），灌胃給藥。藥物組給予四物湯，對照組與CY組給予等體積蒸餾水，連續7d。

2.3 血清EPO的測定小鼠眼眶取血，按常規方法分離收集血清，采用ELISA方法測定血清EPO含量（嚴格按試劑盒說明書操作）。

2.4 腎臟總RNA的提取斷頸處死小鼠后取腎，取100 mg腎組織用1 ml Trizol試劑提取總RNA（按說明書操作），1％瓊脂糖-甲醛變性凝膠電泳及用紫外分光光度計測定OD260/OD280比值鑒定RNA質量。

2.5 反轉錄（RT）取總RNA 1 μg， Oligo(dT)16 0.5 μg在70℃變性5 min后，依次加入5×反轉錄緩沖液4 μl，10 mM 4 dNTP 2 μl，RNA酶抑制劑20U，混勻后置37℃ 5 min，再加入M-MuLV反轉錄酶200 U，總反應體積20 μl，混勻后置42℃反應60 min，然后于70℃加熱10 min，終止反應。

2.6 聚合酶鏈反應（PCR）小鼠EPO cDNA引物與β-肌動蛋白（β-actin）引物由上海生工生物工程技術服務有限公司合成。EPO cDNA引物序列為：5'-CTC TGG GCC TCC CAG TC- 3'和5'-TGT TCG GAG TGG AGC AG- 3'；小鼠特異性的β-actin引物序列為：5'-GTG GGC CGC TCT AGG CAC CA -3'和5'-CGG TTG GCC TTA GGG TTC AGG GGG-3'。EPO cDNA 與β-actin cDNA PCR擴增片段長度分別為410bp與245 bp。PCR反應總體積為50 μl，其中含反轉錄產物2 μl，EPO cDNA引物各0.08 μmol/L，β-actin引物各0.04 μmol/L，dNTP 0.2 mmol/L，Taq DNA聚合酶2.5 U， MgCl2 3.0 mmol/L，10×PCR緩沖液5 μl。PCR擴增條件：94℃預變性2 min，然后94℃ 30 s，55℃ 45 s，72℃ 1 min，循環30次，最后72℃延伸5 min。

2.7 凝膠掃描將PCR產物于2.0％的瓊脂糖凝膠電泳（50bp DNA Marker作分子量標準），在凝膠成像系統中掃描并分析電泳帶的灰度，以特異的EPO cDNA擴增帶灰度與同管擴增的β-actin cDNA擴增帶灰度之比表示EPO mRNA表達水平。

2.8 統計學處理所有資料均以±s表示，組間比較采用t檢驗，所有數據資料采用統計軟件包SPSS11.0完成。

3 結果

3.1 對小鼠血清EPO的影響注射CY后小鼠血清EPO含量明顯升高，CY組與正常對照組比較差異非常顯著（P＜0.001）；四物湯能促進EPO的合成，與正常對照組（P＜0.05）和CY組（P＜0.01）比較均有顯著性差異。四物湯對血清EPO的影響見表1。表1 四物湯對小鼠血清EPO的影響（略）

3.2 四物湯對小鼠腎臟EPO mRNA表達的影響經凝膠成像系統掃描并分析電泳帶的灰度，CY組與正常對照組比較，腎臟EPO mRNA表達無顯著差異（P＞0.05）；四物湯能促進小鼠腎臟EPO mRNA表達，與正常對照組和CY組比較均有顯著差異（P＜0.05）。四物湯對小鼠腎臟EPO mRNA表達的影響見表2。表2 四物湯對小鼠腎臟EPO mRNA表達的影響（略）

4 討論

在造血過程中，骨髓干細胞首先增殖分化為各系定向祖細胞，包括紅系祖細胞（CFU-E）、粒-單核系祖細胞（CFU-GM）、巨核系祖細胞（CFU-MK）和淋巴系祖細胞（CFU-TB），然后逐漸分化成前體細胞（幼稚細胞）和終末血細胞。EPO是一種特異性作用于紅系祖細胞的激素糖蛋白，主要在腎臟合成，并通過與促紅細胞生成素受體（erythropoietin receptor，EPOR）相結合而發揮作用。缺氧和貧血是刺激EPO合成的主要因素［2］。紅系祖細胞（CFU-E）表面存在EPO受體，為EPO反應細胞，EPO與EPOR結合后，激活蛋白激酶，導致反應細胞內蛋白質磷酸化，刺激紅系祖細胞不斷增殖、分化、成熟，從而促進紅系造血。

抗腫瘤藥物環磷酰胺（CY）對骨髓干細胞增殖有明顯的抑制作用，是引起腫瘤患者化療后貧血的主要原因之一。CY以其細胞毒作用抑制細胞分裂，損傷骨髓造血機能，引起血紅蛋白減少，包括紅細胞在內的多系細胞數量減少。研究表明，四物湯能明顯減輕CY對骨髓的抑制、促進骨髓干細胞增殖［3～5］。本實驗在注射環磷酰胺后CY組小鼠血清EPO顯著升高，與正常對照組比較差異非常顯著，而腎臟EPO mRNA表達與正常對照組EPO mRNA表達無顯著性差異，說明CY誘發小鼠貧血后血清EPO水平升高與腎臟EPO mRNA表達不呈平行關系。可能的原因是，CY抑制了紅系祖細胞的生長，使EPO反應細胞減少，EPOR也相應減少，使EPO不能與EPOR結合，即紅系祖細胞對EPO的消耗利用減少，使血清EPO水平增加；而CY引起的貧血對EPO mRNA表達的刺激作用不明顯或刺激時間不夠長，故CY組EPO mRNA表達無明顯增加。藥物組EPO mRNA表達明顯高于正常對照組與CY組，表明四物湯不但能拮抗CY所引起的骨髓抑制，使骨髓干細胞增殖能力恢復正常，而且具有很強的促進小鼠腎臟EPO mRNA表達的作用，從轉錄水平使腎臟合成EPO增加并釋放入血，從而使血清EPO含量增加。故即使有部分EPO與EPO反應細胞上的EPOR結合，即EPO被消耗利用，藥物組小鼠血清EPO仍然明顯升高。

四物湯是經典的中醫補血活血方劑，本實驗結果表明四物湯能明顯增加CY所致貧血小鼠腎臟EPO mRNA的表達，從轉錄水平使其血清EPO含量增加，是減輕CY毒副作用、增強其療效的一種有效途徑，可用于腫瘤患者化療后改善貧血狀況的輔助治療。

【參考文獻】

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第9篇：細胞生物學實驗范文

【關鍵詞】　細胞生物學　實驗教學　科研素質

細胞生物學是生命科學中重要的組成部分，它能夠反映生命科學的形成進程，同時也體現生命科學的最新進展。該學科是由實驗研究產生和發展起來的。因此，細胞生物學研究技術和方法的作用及地位顯得尤為突出，細胞生物學實驗課教學是培養本科生科研素養的重要環節。是研究性學習的重要內容，也是最必要的形式和過程。

1.開設實驗課，是生命世紀所需。細胞生物學的發展經歷了經典細胞學、實驗細胞學及細胞生理學、現代細胞生物學等階段，推動學科理論內容的產生、發展及豐富的動力是實驗研究。例如：顯微鏡觀察方法導致了細胞學的產生，而電子顯微鏡及其它更精細觀察顯像技術的應用，可以觀察細胞內部的亞顯微結構、甚至單一生物分子的位置，更加準確描述細胞的結構與功能。

在大三開設細胞生物學實驗課是適時的。大三本科生經過動植物學的學習初步了解動植物細胞的一般特性：通過微生物學的學習，則了解微生物在細胞形態、結構及功能等方面的特殊性；生理學與生物化學的學習，掌握了細胞生命活動的動態性，并且有了相應的實驗技能。在此基礎上，本科生能夠適應較為復雜的細胞生物學實驗課的學習和操作。

細胞生物學實驗技術直接與當今生命科學的前沿技術接軌，在高年級開設這樣的課程，有助于本科生迅速進入畢業論文研究的狀態，有助于考研進入更深層次的研究工作。

2.選擇實驗課內容，注重基本能力和創新能力的培養。參考國內主要細胞生物學實驗教材，自編實驗教材，編寫過程中，注重介紹與某一個實驗項目相關的背景知識和實驗原理。例如：光學顯微鏡的使用是最基本的細胞生物學實驗，是從事生物學教學和科研必備的基本技能，在實驗教材中，作詳細介紹，列出不同放大倍數物鏡的鏡口率、工作距離、景深和視野直徑等參數，使學生明確“放大倍數小的物鏡工作距離大，放大倍數大的物鏡工作距離小，物鏡是顯微鏡中關鍵部件”等基本規律，有助于使用和選擇顯微鏡。

設計了染色體制備和分帶的內容，可以允許每個人動手操作，完成整個實驗程序，得到預處理、樣品制備、離心、顯微鏡使用等綜合技術的訓練。事實反映出操作認真、嚴謹的同學能獲得較理想的實驗結果。

選編了細胞培養、熒光顯微鏡技術等較高要求的實驗內容，并附編了相應的前沿技術，如激光共聚焦顯微鏡原理。這些都是從事細胞生物學科研工作所需的研究技術，該類實驗內容的開設，使學生初步了解細胞生物學研究的基本技術路線和實驗方法，使學生對實驗課的認識從完成操作、獲得學分過渡到科研綜合性、探索性，乃至創新性的高度。

詳盡描述實驗操作步驟，特別是不可忽視的、影響實驗成敗的關鍵細節，以及實驗試劑、藥品的配制和儀器實驗注意事項等內容。注意操作過程與實驗原理的結合，增加圖解。例如小鼠骨髓細胞染色體標本制備和C帶分析實驗，操作步驟多，影響因素多，相對成功率較低，學生興趣濃。操作程序的清晰、嚴格要求是完成實驗的重要保障。

設計具有啟發性的創新性實驗及實驗后思考題，以激發學生利用所學理論知識和實際動手經驗，熟悉怎樣設計實驗、組建哪些實驗技術達到實驗目的、哪些步驟是控制實驗的關鍵及其影響因素，甚至可提出修改的方案。

3.注重課前準備，確保實驗質量。教師持之以恒動手從事科研實驗工作，掌握或了解本學科研究技術的過去、現在及將來。堅持與實驗員設計、商討、準備實驗，要有預瞻性，掌握實驗中可能出現的問題，以便在課堂及時準確回答學生問題。

作為實驗教學的主體，學生的臨陣狀態也很重要。不少學生習慣于課前不預習，課堂上一邊對照實驗指導，一邊操作，經常導致操作混亂、時間延長甚至實驗失敗。目前，此類現象仍然較普遍，教師需注意檢查督促，進行關鍵性問題提問、請個別學生上臺操作示范，教師再對其中的注意事項、操作錯誤重點強調。另外，可將預習作為實驗成績的一部分，學生有備而來，提高實驗質量。

4.細致指導，重視基本技能訓練。細胞生物學實驗包括形態、結構觀察性實驗，也包括操作復雜、技術綜合的實驗，要求學生牢固地掌握基本實驗技能，如顯微鏡及特殊顯微鏡的熟練操作，微觀世界的確認，臨時與永久玻片制作，實驗動物解剖，生物繪圖方法，離心機的使用，細胞生物學染色體方法，細胞培養過程的無菌要求，這些基本技能都是每個學生必需的。教師必修逐個指導、示范和糾正，培養學生正確的規范的操作習慣。嚴謹的科學態度、創新的精神和嚴格的實驗習慣，是科研最基本的素養，而本科細胞生物學實驗是訓練的最好平臺。

5.誘導啟發，培養創造性思維。細胞生物學實驗項目廣泛，材料具有多樣性和普遍性，教師給學生安排的實驗是挑選了典型的材料和經典的實驗方法。教師應鼓勵學生在完成實驗指導指定實驗基礎上，提出衍生性的實驗題目，讓學生書面自行設計實驗(包括實驗材料、方法、目的)，有條件情況下，少部分同學進行創新性實驗。強調科研協作的重要性，鼓勵同學之間互相學習，有利于同學們開闊視野、培養敏捷的思維，激發對科學的求知欲和對本課程的興趣。